Bifidobacterium cinsi bakterilerin bazı probiyotik özelliklerinin belirlenmesi

Bu çalışmada, anne sütü ve anne sütü ile beslenen bebeklerin dışkısından mupirosin ilave edilerek değiştirilen BSM katı besiyeri kullanılarak 59 adet bifidobakteri izole edilmiştir. İzolatlar fruktoz?6-fosfat fosfoketolaz enzimi ile cins düzeyinde tanımlanmış ve 31 adet bifidobakteri belirlenmiştir. İdentifikasyon sonuçları B. breve (15 suş)' nin predominant olduğu göstermiştir. Tüm suşların asit direnci, safra toleransı, ekzopolisakkarit üretimi, antimikrobiyal aktiviteleri ve hemaglütinasyon kabiliyetleri gibi probiyotik kullanım açısından önemli olan bazı özellikleri araştırılmıştır. Suşların asit direnci, safra toleransı ve EPS üretimi spektrofotometrik olarak belirlenmiştir. Bifidobakterilerin EPS üretimi ile asit direnci (p<0,05) ve safra toleransı (p<0,05) arasında pozitif bir ilişki bulunmuştur. Aynı zamanda, bifidobakterilerin önemli bir bağırsak patojeni olarak bilinen E. coli ATCC 11229 üzerinde zon çapı 0- 9±1 mm arasında değişen oranlarda inhibisyon etkisi gösterdiği tespit edilmiştir. Epitel yüzeye tutunma çalışmasından önce epitel yüzeye tutunmada önemli rol oynadığı düşünülen suşların hemaglütinasyon kabiliyetleri araştırılmıştır. Suşların 10 adedinde orta (+, ++) ve yüksek (+++) dereceli hemaglütinasyon kabiliyeti saptanmıştır. Epitel yüzeye tutunma çalışmasında ise asit direnci (pH 3,5- OD600; 0,98±0,01), safra toleransı (% 0,40-OD600; 1,43±0,01), EPS üretim kapasitesi (97,64±0,01 mg/L), E. coli ATCC 11229 üzerindeki inhibisyon etkisi (9±1 mm), hemaglütinasyon kabiliyeti (+++) yüksek olan B. breve A28 suşu ve tüm bu özellikler bakımından zayıf olan B. bifidum A10 suşu kullanılmıştır. B. breve A28 suşunun epitele tutunma indeksi 300< bakteri/hücre olarak belirlenirken, B. bifidum A10 suşunun epitele tutunma indeksi 19 bakteri/hücre olarak bulunmuştur. Tüm tutunma sonuçları taramalı elektron mikroskobu ile de doğrulanmıştır. Prebiyotik uygulamasında, yüksek EPS üretimine sahip A28 suşunun inulinsiz ortamdaki canlılığı 7,1x108 cfu/ml iken, inulinli ortamda 7,4x1011 cfu/ml olarak belirlenmiştir. E. coli ATCC 11229' nin canlılığında inulinli ortamda dikkate değer bir değişiklik gözlenmemiştir. A28 suşu taşıdığı bütün bu özelliklerinden dolayı sindirim sisteminde uzun süre canlı kalabilecektir. Bu nedenle, çalışmada probiyotik bakteri olarak B. breve A28 suşunun kullanımı önerilmektedir.