Buzağılarda sepsis patogenezinde RIPK1, RIPK2 ve RIPK3 ifadesinin rolü

Sepsis, enfeksiyona karşı gelişen disregüle inflamatuvar yanıt olup genellikle organ disfonksiyon sendromu ile sonuçlanmakta ve ölüme neden olmaktadır. Sepsis için bugüne kadar spesifik bir tedavi yöntemi mevcut değildir. Sepsisi teşhis etmek amacıyla klinik uygulamada kullanılan geleneksel biyobelirteçler sepsisi diğer hastalıklardan ayırt etmede yetersiz kalmaktadır. Bu nedenle, sepsisli hastaları tedavi eden klinisyenleri daha iyi bilgilendirebilecek yeni biyobelirteçlere belirlenmesine ihtiyaç vardır. Hücre ölüm mekanizmaları sepsis patogenezinde özellikle immünosupresyonun gelişiminde önemli rol oynamaktadır. Yapılan çalışmalar hücre ölüm yolaklarından nekroptozisin sepsis patogenezinde önemli bir role sahip olduğunu göstermektedir. Bu çalışmada ise nekroptozis yolağında rol oynayan reseptör ile etkileşen protein kinaz 1 (RIPK1), RIPK2 ve RIPK3'ün sepsisli buzağılara ait kan örneklerinde mRNA seviyeleri değerlendirilerek veteriner hekimlikte sepsis patogenezindeki rolleri ve sepsis teşhisinde biyobelirteç olarak kullanılma potansiyellerinin ortaya koyulması amaçlanmıştır. Çalışmamızda 1-20 gün yaş aralığında olan 20 holştayn buzağı ve kontrol grubu olarak aynı yaş aralığında olan 10 sağlıklı (holştayn) buzağı değerlendirilmiştir. Enterit enfeksiyonu şekillenen ve hastalığın ileriki aşamalarında sepsis kriterlerini sağlayan buzağılar çalışmaya dâhil edilmiş ve kan örnekleri lökosit (WBC), eritrosit (RBC), hemoglobin (Hb), hemotokrit (Ht) ve trombosit parametreleri ölçülmüştür. Arta kalan kan örneklerinden total RNA izole edilmiş, elde edilen RNA örneklerinden İScript Reverse Transkiripsiyon kiti kullanımı ile cDNA sentezlenmiş ve kantitatif PCR (qPCR) yöntemi kullanılarak hedef genlerin göreli ifade seviyeleri belirlenmiştir. qPCR sonuçları RIPK1 ve RIPK3 ifadelerinin sepsisli buzağılarda kontrol grubuna göre önemli derecede azaldığını gösterirken, RIPK2 ifade seviyesi düşük olduğu için örneklerde saptanamamıştır. Sonuç olarak, veteriner hekimlikte sepsisli buzağıların teşhisinde RIPK1 ve RIPK3 mRNA ifadelerinin biyobelirteç olarak kullanılmasının faydalı olabileceği düşünülmüş ancak daha ayrıntılı deneysel sepsis modellerinin kurulması gerekliliği görülmüştür.