Aptamer tabanlı CD62 tanı kiti geliştirilmesi

Hastalığa özgü biyobelirteçler, teşhis ve önleyici veya terapötik stratejilerin etkinliğinin izlenmesi dahil olmak üzere patolojik süreçlerin zamanında ve etkin yönetimi için önemli bir araçtır. P-selektin, aktive edilmiş trombositler ve endotel hücreleri tarafından spesifik olarak eksprese edilir ve trombüs oluşumu, immün yanıt oluşumu gibi birçok fizyolojik süreçte rol alır. Kalp krizi, felç, bazı immün hastalıklar ve kanser gibi bazı patolojik durumlarda serum ve plazma p-selektin (CD62) düzeylerinin arttığı bilinmektedir. Günümüze kadar, p-selektin düzeylerini ölçmek için birçok yöntem geliştirilmiştir. Aptamerler, moleküler şekilleri temelinde belirli biyomolekülleri hedeflemek için kullanılabilir. Eksponansiyel zenginleştirme ile Ligandların Sistematik Evrimi (SELEX), spesifik makromoleküler hedefler için yüksek afiniteli aptamerlerin seçilmesinde kullanılan yaklaşımdır. Bu çalışmada, CD62'nin ölçümü için aptamer tabanlı yeni bir kit geliştirilmiştir. Ġlk olarak, CD62'ye spesifik olarak bağlanan aptamerler, SELEX yöntemi kullanılarak izole edilmiştir. Kullanılan aptamerler arasında Apt-1, Apt-2 ve Apt-3 yüksek afinite ile CD62 proteinine bağlanmıştır. CD62'ye en yüksek afinite ile bağlanan Apt-2 için bağlanma sabiti -9,6 kcal/mol ve ayrılma sabiti (Kd) 18,15 ± 2,36 nM olarak bulunmuştur. Özgünlük testinde negatif kontrol olarak sığır serum albümini kullanılmış ve seçilen aptamerlerin bu proteine bağlanmadığı belirlenmiştir. Sonuç olarak, bu çalışma ile CD62'nin ölçümü için hassas, spesifik, zaman tasarruflu ve düşük maliyetli bir kit geliştirilmiştir.