Ecballium elaterium bitkisinde hücre süspansiyon kültürü tekniği ile sekonder metabolit (kukurbitasin B) üretimi

Ecballium elaterium, halk arasında sinüzit tedavisinde sıkça kullanılmaktadır. Kukurbitasin B, antienflamatuar aktiviteden sorumlu madde olarak izole edilmiştir. Bu çalışmanın amacı, E. elaterium' ûa hücre süspansiyonu kültürü tekniği kullanarak kukurbitasin B miktarını arttırabilmektir. Kallus kültürleri gövde düğümlerinden, değişik büyüme düzenleyicileri; 1 mg/l BA, 0.5 mg/l NAA (1. ortam), 1 mg/l BA, 0.1/1 mg NAA (2. ortam, 2. ortam 1. alt kültür kallusu) ve 2 mg/l 2,4-D, 1 mg/l Kinetin (3. ortam) taşıyan MS ortamlarından elde edilmiştir. 1., 2. ve 2. ortam 1 alt kültürleri kalluslarının 2. ortamda ve 3. ortam kalluslarının 4. ortamda (1 mg/l 2,4-D, 0.5 mg/l Kinetin) süspansiyon kültürleri hazırlanmıştır. Hücre süspansiyon kültürlerinde kukurbitasin B tespit edilemediği için uyarıcı ilave edilmesi düşünülmüş ve uyarıcı konsantrasyonu ve ilave edilme zamanının kukurbitasin B oluşumu üzerindeki etkisi araştırılmıştır. Test edilen uyarıcılar, bira mayası, metil jasmonat ve potasyum dihidrojenfosfat, kukurbitasin B üretimini önemli oranda arttırmıştır. Metil jasmonat kullanıldığında 1. ortam, 2. ortam 1. alt kültürde (başlangıç, 200 pM MJ) ve 2. ortamda (6. gün 50 uM MJ) maksimum kukurbitasin B konsantrasyonları sırasıyla 6.138, 6.023 ve 5.866 mg/l olarak tespit edilmiştir. Bu çalışmada en yüksek kukurbitasin B, fosfat miktarının, 2. ortamda 12. gün 340 mg/l'e arttırılması ile elde edilmiştir (6.453 mg/l). Bu sonuçlar, E. elaterium hücre süspansiyon kültüründe uyarıcı ilavesinin kukurbitasin B üretimini arttırabileceğini göstermektedir.