Gıardıa Lamblıa'nın moleküler teşhisi ile direk yöntemlerin karşılaştırılması

Giardia lamblia, sıklıkla insanları enfekte eden ve uzun süreli bakteriyel olmayan ishallere yol açan yaygın bir parazit organizmadır. Bu parazitten kaynaklanan hastalık salgınları genellikle gıda ve su kaynaklarının kirlenmesine bağlanmaktadır. Birkaç gün boyunca elde edilen dışkı örneklerinde mikroskop analizinin kullanılması, bu özel parazitin neden olduğu hastalığın kesin olarak doğrulanmasını sağlayamayabilir. Daha düşük hassasiyet, kistlerin ve/veya trofozoitlerin rastgele salınmasından veya dışkı örneklerinin bu konuda eğitim almamış kişiler tarafından analiz edilmesinden kaynaklanabilir. Jejunal biyopsi ve duodenal aspirat incelemesi gibi alternatif teknikler daha olumlu sonuçlar sağlar. Ancak yine de istilacı doğaları nedeniyle pratiklikleri sınırlıdır. PCR tespiti mikroskobik incelemeden daha hassastır, bu nedenle dışkı örneklerinde küçük miktarlardaki kistlerin tespitinde daha avantajlıdır. PCR tekniği, amplifikasyon için belirli genleri hedefleyerek Giardia DNA'sını seçici olarak amplifiye etmek için kullanılmıştır. Kesitsel tipteki bu çalışmaya, Tawfek hastanesine doktorun tanısı ve semptomları üzerine steatore şikayeti ile başvuran, her iki cinsiyetten ve 10 yaş altı 50 hasta dahil edildi. Her hastadan yaş, cinsiyet ve yerleşim yeri dahil olmak üzere tüm demografik veriler elde edildi. Yaklaşık 20 gr dışkı örneği steril plastik bir kap kullanılarak toplandı ve iki parçaya dağıtıldı. Birinci bölüm; mikroskobik inceleme için 10 gr dışkı kullanılmış ve iki parçaya bölünmüştür: 5 gr native-lugol mikroskobi ve 5 gr konsantrasyon yönteminde kullanılmıştır. İkinci kısım; moleküler inceleme için saklandı ve iki parçaya bölündü: 5 gr %70 etanol içinde saklandı ve 5 gr %2,5 potasyum dikromat içinde -20°C'de derin dondurucuda saklandı. Bunlardan kullanacağımız miktarlar alınarak testler yapılmıştır. Hastaların demografik özelliklerine göre yaşları 1 ile 10 arasında, erkeklerin sayısı 32 (%64) ile kadınlara göre 18 (%36) daha fazlaydı. Ayrıca kırsal kesimde yaşayan hastaların sayısı kentte yaşayanlara göre 29 (%58) daha fazla, 21 (%42). Bu çalışma sırasında tüm hastalardan alınan 50 dışkı örneğinden, mikroskobik incelemeye (native-lugol ve konsantrasyon) göre örneklerin yalnızca 8'i (%16) G. lamblia enfeksiyonu açısından pozitif iken, 42'si (%84) negatifti. Polimeraz zincir reaksiyonu tanısına göre (%70 etanolde) örneklerin 44'ü (%88) G. lamblia enfeksiyonu açısından pozitif, 6'sı (%12) negatif çıktı. Mikroskobik incelemede hastalar arasında yaş, cinsiyet ve yerleşim yerine göre (sırasıyla p değeri 0,608, 0,303 ve 0,255) istatistiksel olarak anlamlı farklılık yoktu. Buna karşılık hastalar arasında yaş ve cinsiyete göre istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar bulunurken (sırasıyla p değeri 0,008 ve 0,057), yerleşim yerine göre hastalar arasında moleküler inceleme açısından istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar (p değeri 0,499) vardı. Ayrıca %70 etanol içerisinde korunan pozitif örneklerin sayısı (44), %2,5 potasyum dikromat içinde korunan örneklerle (43) karşılaştırıldığında yüksekti. Ayrıca bu parazitin çocuklarda görülme sıklığı daha fazlaydı ve erkeklerde kadınlara göre daha yaygın görülüyordu. Ek olarak, hastaların önemli bir kısmının metropol alanların aksine kırsal bölgelerden geldiği tespit edildi. Sonuç olarak bulgular, Giardiasis tanısı alan bireylerin dışkı örneklerinden başarılı bir şekilde geri kazanılması, PCR'nin mikroskopi gibi geleneksel teşhis tekniklerine göre potansiyel avantajlarını vurgulamaktadır.