Kandidemi etkeni candida albicans'a karşı nötrofil yanıtının erken dönemde incelenmesi

Candida albicans, insanlarda kan dolaşımı enfeksiyonuna (kandidemi) sebep olan başlıca mantar ajanıdır. Normal mikrobiyota elementi olarak C. albicans, sağlıklı insanların %30'undan %70%'ine kadar deri, ürogenital bölge veya bağırsak mucozasında görülmektedir. Risk faktörlerinin ortamda bulunmasıyla ve C. albicans virülans faktörlerinin katkısıyla C. albicans, komensal halden fırsatçı patojen fazına geçmektedir. C. albicans'ın en önemli patojenez özelliklerinden biri de morfoloji değişikliğine gidebilmesidir. Nötrofiller ise kankidemiye karşı en etkili ve önemli savunma hücrelerimizdendir. Nötrofillerin, C. albicans'ın sebep olduğu enfeksiyonun değişen aşamalarına verdiği cevaplar henüz tam olarak aydınlatılamamıştır. Bu çalışma, nötrofillerin C. albicans'ın farklı fenotiplerine karşı erken dönemdeki yanıtını, moleküler ve hücresel bakış açılarıyla araştırmayı amaçlamaktadır. Nötrofiller, sağlıklı gönüllülerden toplanmıştır ve MO1:1 oranında, opsonize C. albicans'ın maya ve hif formlarının her biriyle 30 dakika, 1 saat ve 4 saat olarak inkübe edilmiştir. Tüm deney setleri Gram (+) (S. aureus) ve Gram (-) (E. coli) kontroller de içermektedir. Mikroorganizmalar ile, ilgili sürelerde uyarılmadan sonra nötrofil aktivasyonu birçok metot ile ölçülmüştür. Örneğin, qRT-PCR ile myeloperoksidaz (MPO) ve nötrofil elastaz (ELANE) ekspresyonu, akış sitometrisi ile CD66b ve CD11b yüzey reseptörleri, ELISA metodu ile farklı sitokin salınımları, konfokal mikroskop ile nötrofil-C. albicans etkileşimi gösterilirken nötrofillerin C. albicans üzerindeki öldürme etkisi de koloni sayma metodu ile analiz edilmiştir. MPO (10.97 kat) ve ELANE (7.49 kat) ekpresyon analizlerinde, tüm inkübasyon zamanlarında en yüksek aktivasyon diğer mikroorganzimalara kıyasla C. albicans hif formuna karşı gözlemlenmiştir (p<0.05). Yüzey aktivasyon belirteci analizinde, ilk 1 saat etkileşim sonrası nötrofillerin CD66b seviyesi C. albicans maya formuna (39%) kıyasla, hif formuna (69%) karşı daha çok artmıştır (p:0.007). ELISA sonuçlarına göre, C. albicans hif formuna karşı anlamlı olarak sentezlenmese de, nötrofiller 4 saat etkileşim sonrası C. albicans maya formuna karşı IL-17A salgılamaktadır (p<0.05). Ayrıca, nötrofiller ve canlı, opsonize-C. albicans arasındaki etkili ve öldürücü fagositik etkileşim konfokal görüntülenme ile gözlemlenmiştir. Sonuç olarak, bu çalışma ile nötrofillerin C. albicans'ın farklı morfotiplerine, belirli zaman aralıklarında verdiği yanıtı aydınlatılmaya çalışılmıştır. Bütün deney setlerimiz desteklemektedir ki, nötrofiller primer olarak oksidatif mekanizmalarını, granüler enzimlerini ve fagositik etkilerini kullanarak C. albicans hif formunu elimine etmeye çalışmaktadır. Birden fazla aşamalara ayrılan bu enfeksiyonda, nötrofiller ilk 1 saat içinde patojene karşı maksimum yanıtı göstermektedir.