Menstruel kan-periferal kan ayırımında çeşitli mirna belirteçlerinin incelenmesi

Olay yerinde menstruel kan, periferal kan, semen, tükürük ve vajinal sekresyon gibi vücut sıvıları yaygın olarak bulunan en önemli biyolojik örneklerdir. Bunlar bir ceza davasının niteliksel olarak analiz edilmesine, olay yerinin yeniden canlandırılmasına ve mahkeme salonu için güçlü delillerin sağlanmasına yardımcı olacak belirleyici ipuçları sağlar. Benzer şekilde, menstruel kan ile periferal kan ayrımı, bazı ceza davalarının mahiyetini anlamak için güçlü veriler sunacağından, adli vaka çalışması için hayati öneme sahiptir. Bu çalışmada, 5 farklı vücut sıvısından oluşan toplam 96 biyolojik materyalde (21'i periferik kan, 21'i adet kanı, 20'si tükürük, 13'ü meni ve 21'i vajinal sekresyon) beş farklı miRNA'nın (miR-451, miR-144, miR-214, miR-203, miR-205) ekspresyon seviyeleri SYBR green tabanlı gerçek zamanlı PCR ile analiz edildi. Endojen kontrol olarak SNORD48 kullanıldı. Daha sonra seçilen aday belirteçlerin ekspresyon seviyeleri SPSS 22.0 ile yapılan diskriminant fonksiyon analizi ile karşılaştırılarak menstrüel kan ile periferik kan ayrımının mümkün olup olamayacağı araştırıldı. İlk adımda kan örneklerini kan dışı örneklerden ayırmak için miR451'in delta CT değerleri bağımlı değişken olarak, kan ve kan dışı örnekler de bağımsız değişkenler olarak seçildi. İkinci adım olarak iki farklı yol izlendi. İkinci adım için seçilen yollardan birinde, periferik kanı menstruel kandan ayırt etmek için bağımlı değişkenler olarak MB ve PB, bağımsız değişkenler olarak miR-214, miR203 ve miR205 seçildi. İkinci adım için seçilen diğer yolda ise bağımsız değişken olarak miRNA'lardan yalnızca miR203 seçildi. Kan örneklerini kan dışı örneklerden ayırmak için kullanılan fonksiyon testi Z1 ve Z2; menstrüel kanı periferal kandan ayırmak için kullanılan fonksiyon testi Y1 ve Y2 olarak adlandırıldı. Takip edilen iki aşamalı yöntem ile 21 test numunesi kullanıldığında %100 doğruluk oranına ulaşıldı. Bu başarı ikinci adımda hem miR-214, miR-203 ve miR-205'in birlikte bağımsız değişken olarak kullanılması durumunda hem de değişken olarak sadece miR-203'ün kullanılması durumunda geçerliydi. Bu sonuçlar, miR451 ve miR203'ün tek kaynak kanı menstrüel kandan ayırmada yeterli olacağını ve adli vakaların analizinde başarıyla kullanılabileceğini gösterdi. Çalışmada 5 ng RNA ile sonuç alınabildiği için az miktardaki adli örneklerde de kullanılması mümkün olmaktadır