FSH promotes progesterone synthesis and output in human granulosa cells without luteinization

Günümüz üremeye yardımcı tedavi (ÜYTE) uygulamalarında hipofiz bezini baskılamak için kullanılan GnRH analogları prematür LH piki görülme sıklığını IVF sikluslarında %2'nin altına düşürmüştür. Bununla birlikte, geç foliküler fazda LH piki öncesi serum progesteron seviyelerinde artış görülme sıklığı GnRH agonist ile stimüle edilen IVF sikluslarında %35'i ve GnRH antagonist ile stimüle edilen sikluslarda da %38'i bulmaktadır. Serum progesteron düzeylerinde ovülasyon öncesi görülen prematür artış IVF sikluslarında endometriyal histolojiyi ve endometriyal gen ekspresyonlarını değiştirerek reseptiviteyi azaltabilmektedir. Bunun sonucunda da taze embryo transferlerinde düşük implantasyon ve klinik gebelik oranlarıyla karşılaşılmaktadır. Prematür progesteron yükselmesinin doğal sikluslara oranla stimüle sikluslarda görülmesi ve stimülasyonun derecesiyle kuvvetli korelasyon göstermesi bu prematür yükselmeden FSH stimülasyonun direkt olarak sorumlu olduğunu düşündürmektedir (hCG günü estradiol düzeyi, antral folükül sayısı ≥ 14mm ve elde edilen oosit sayısı). Bu hipotezi araştırmak amacıyla düzenlenen deneysel dizaynda cevap aranılan sorular şunlardır: 1) FSH uygulaması granüloza hücrelerinde progesteron üretimini 3β-HSD geninin ekspresyonunu yükselterek mi stimüle etmektedir? 2) FSH uygulaması ile ovaryan seks steroidogenez enzimlerinin ekspresyonlarında görülen yükselme korelasyon göstermekte midir? Bu amaçla lüteinze olmayan mitotik granüloza hücreleri ve over kortikal örnekleri DMEM-F12 kültür medyumu kullanılarak mililitre başına 12.5, 25 ve 50 mIU olmak üzere üç farklı FSH dozu ile farklı zaman aralıklarında inkübe edilmiştir. İnkübasyon periyotları sonunda steroidogenik enzimlerde FSH'a bağlı meydana gelen değişimler mRNA düzeyinde qRT-PCR ile ve protein düzeyinde western blot ile incelenmiştir. In vitro E2 ve Progesteron düzeylerini elektrokemiluminesans (ECLIA) methoduyla ölçülmüştür. Son olarak da 3β-HSD'nin protein ekspresyonunun yanı sıra işlevini de gösterebilmek için spektrofotometrik method ile enzimatik aktivitesine bakılmıştır. Bu tez, gonadotropin stimülasyonu uygulanan sikluslarda foliküler faz sırasında açıklanamayan P yükselmesine moleküler bir açıklama sağlamaktadır. Sunulan bulgular, IVF tedavisi gören kadınlarda prematür P artışını önlemeye yönelik potansiyel mekanizmaları ortaya çıkartmak için yapılacak çalışmalara örnek oluşturabilir.