CRISPR-Cas9 genom düzenleme teknolojisi kullanılarak malarya paraziti dna fotoliyaz geni için gen hedefleme çalışmaları

Ultraviyole (UV) ışık, iki timin bazını pirimidin dimerlerine dönüştürerek DNA'ya zarar verir. Memeliler dışındaki tüm organizmalarda bu hasar fotoliyaz enzimi tarafından onarılır [1, 2]. Prof. Dr. Aziz SANCAR, sirkadiyen ritmin kontrolünde yüksek ökaryotlarda fotoliyaz enziminin homologunun fonksiyon karakterizasyonu ile Nobel Ödülü'nü kazanmıştır. Şaşırtıcı bir şekilde, sıtma parazitinin veya herhangi bir başka parazitik protozoanın fotoliyaz geni üzerinde hiçbir araştırma yapılmamıştır. Yakın zamanda, genetik olarak düzenlenmiş bir sirkadiyen ritmin sıtma parazitlerinin gelişimini ve büyümesini dış ışık uyaranlarına göre sıkı bir şekilde kontrol ettiği doğrulanmıştır [3]. Ancak bu sistemi kontrol eden genetik faktörler henüz keşfedilmemiştir. DNA onarım enzimi olarak varsayılan işlevine ek olarak kemirgen sıtma paraziti DNA Fotoliyaz enziminin parazit sirkadiyen ritim düzenlenleme mekanizmasındaki rolünü araştırmak için, genomda hedef dışı endonukleaz aktivitesini sınırlandırma ve DNA Fotoliyaz geninin fonsiyonunu araştırma amacıyla gen delesyonu ve insersiyonu, etikletlenmesi için gelişmiş özgüllük özelliğine sahip yeni bir CRISPR-Cas9 sistemi kullanılmıştır. DNA Fotoliyaz nakavt parazitleri, doğal tip (WT) parazitlere kıyasla normal olarak kan-evre aşamasında parazit çoğalmasında başarısız olmuştur, ortam ışığı koşullarının bozulmaları uygulandığında parazit çoğalmasında daha şiddetli azalma olmuştur. Böylece, başlangıçta sıtma parazit DNA Fotoliyaz geninin ışık / karanlık döngüsüne verilen yanıtların düzenlenmesindeki rolünü ve UV ışığına maruz kalma nedeniyle DNA onarımında ek bir işlevi doğruluyoruz. Bu nedenle, sıtma parazitindeki ve diğer patojenik mikroorganizmalardaki DNA Fotoliyaz geninin moleküler işlevini ayrıntılandırmak için daha derinlemesine bir araştırma yapılmasına ihtiyaç duyulmaktadır.