Hepatit B yüzey antijeni 95-109 peptid dizisinin sentezi ve polielektrolitler ile suda çözünebilen biyokonjugatlarının geliştirilmesi

Tez çalısmamızda, Hepatit B virüsüne ait yüzey antijeni peptidi (HBsAg) epitoplarından 95- 109 amino asid dizisinin sentezi yapılmıstır. Bu peptidin sentetik polianyonlar ile farklı yöntemler (Sulu ortamda ve organik ortamda mikrodalga destekli) kullanılarak sentezlenen biyokonjugatlarının fizikokimyasal özellikleri incelenmistir. Hepatit B virüsünün yüzey antijen epitopuna ait 95-109 amino asid dizisi: WLVLLDYQGMLPVCPL seklindedir. Bu peptidin sentezi, Merrifield tarafından gelistirilen Katı Faz Peptid Sentezi (SPPS) yöntemi ile Liberty Mikrodalga Peptid Sentezi Cihazında (CEM), Fmoc kimyası kullanılarak yapılmıstır. Literatürde bulunmayan yeni bir yaklasımla, ilk kez Hepatit B yüzey antijen epitoplarından 95-109 amino asid dizisinin amino ucuna Triptofan amino asidi eklenmistir. Böylelikle sentezlenen peptide floresans özellik kazandırılarak, sentezlenen peptidin florosans spektrofotometre cihazı ile incelenmesine olanak saglanmıstır. Tez çalısmamızda, yüksek immünejeniklige sahip peptid konjugatlarını elde etmek için yeni bir yaklasım olarak; antijenik peptid moleküllerinin konjugasyonunda tasıyıcı olarak kendiliginden adjuvant etkisine sahip olan sentetik polianyonlar kullanılmıstır. Peptid antijeni olarak HBsAg'nin hidrofobik özellikli ve tek bir amin grubu içeren 95-109 dizisinin seçilmesi, gerek temel fizikokimyasal arastırmalar gerekse de daha immunojenik biyokonjugatların gelistirilebilmesi için varsayılmıstır. HBsAg'nin 95-109 amino asit dizisinin biyopolimerlerle sulu ortamda yapılan biyokonjugasyonlarında, farklı baslangıç mol oranları (nPeptid/nPolimer= 1, 3, 5, 7, 9 ) ve farklı aktivasyon mekanizmaları kullanılarak, biyokonjugatların fizikokimyasal davranısları incelenmistir. Ayrıca susuz organik ortamda, mikrodalga destekli yöntemle sentezlenen polimer-peptid konjugatı da, yeni bir yöntem olarak incelenmistir. Sentezlenen biyokonjugatların yapı ve karakterizasyonunu HPLC, VISCOTEK [Dört Detektörlü-UV, Refraktif Indeks, Viskozite ve Isık Saçılması, kromatografik Sistem] ve FTIR gibi spektroskopik ve flourimetrik (Floresans Spektrofotometre cihazı ile) yöntemlerle incelenmistir. Aktivasyon ve konjugasyonun mekanizması ve olusan konjugatların yapı modelleri tartısılmaktadır. Anahtar kelimeler: Katı faz peptid sentezi, sentetik peptidler, biyokonjugasyon, polielektrolit