Hiperglisemik koşullarda insan umbilikal kord venöz endotel hücrelerinde otofaji mekanizmasının araştırılması

Amaç: Hiperglisemi, kanda aşırı miktarda glukoz bulunmasıyla karakterize bir durumdur. Damarların yapı taşı olan endotel hücreleri, hiperglisemiye karşı oldukça duyarlıdır. Otofaji, açlık ve stres koşullarında hücrenin hayatta kalma ve enerji metabolizmasını düzenleyen bir mekanizmadır. Bu çalışmada hiperglisemik koşullarda insan umbilikal kord venöz endotel hücrelerindeki (HUVEC) otofaji mekanizmasının incelenmesi amaçlanmıştır. Yöntem: İnsan umbilikal kord venöz endotel hücreleri, göbek kordonun venlerinden izole edildi ve farklı glukoz konsantrasyonlarına (5, 17, 25 mM Glukoz) sahip hücre besiyerlerinde 24, 48 ve 72 saat inkübe edildi. İnkübasyon işleminin sonunda hücreler Western Blot ve Real Time PCR analizleri için hazırlandı ve otofaji belirteçleri olan LC3, p62 ve Beklin-1, gen ve protein seviyeleri gruplar arasında karşılaştırıldı. Bulgular: 24 saat hiperglisemik gruplardaki LC3 miktarı, kontrole kıyasla anlamlı derecede azaldı. 48 saat hiperglisemik gruplarda LC3 miktarı, kontrole göre istatistiksel olarak anlamlı derecede arttı. 72 saat hiperglisemik gruplardaki Beklin-1 ve LC3 miktarları, kontrole kıyasla anlamlı olarak arttığı tespit edildi. p62 protein miktarının ise 72 saat hiperglisemik gruplarda, kontrole kıyasla anlamlı derecede azaldığı belirlendi. Sonuç: İlk 24 saatte hiperglisemiye bağlı olarak hücrelerde otofajinin azalması, glukoz aracılığıyla otofajinin inhibe olduğunu göstermektedir. Ancak 48 ve 72. saatlerde otofajide artış tespit edilmiştir. Otofaji artışının nedeni hiperglisemik ortama maruz kalma süresinin uzamasıdır. Sonuç olarak HUVEC hücrelerinde otofaji mekanizması zamana ve maruz kaldığı glukoz miktarına göre değişim göstermektedir. Anahtar Kelimeler: hiperglisemi, insan umbilical kord venöz endotel hücreleri, otofaji