İnsan serum ve domuz böbrek prolidazının özellikleri

ÖZET Yüksek Lisans Tezi İNSAN SERUM VE DOMUZ BÖBREK PROLİDAZININ ÖZELLLÎKLERİ Emine Sibel NAMIDURU Gaziantep Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Biyokimya Anabilim Dalı Danışman : Doç. Dr. Yüksel ÖZDEMÎR Ocak 1999 - 74 Sayfa Bu çalışmanın amacı, insan serum ve saf domuz böbrek prolidazmm optimal deney koşullarının ve kinetik özelliklerinin saptanmasıdır. Serum kaynağı olarak 30 sağlıklı bireyin kanlarından oluşturulan serum havuzu kullanıldı. Ayrıca enzim aktivitesi üzerine bazı metal iyon ( Mn+2, Fe+2, Zn+2, Hg+2, Mg,+2 Cu+2 ve Sr+2 ) ve maddelerin ( EDTA, ÎAA, p-CMBA ve glutatyon ) etkileri araştırıldı. Her üri enzimde de optimal aktivite, final konsantrasyonu 2.5mmol/l Mn+2 ve 40 mmol/1 tampon ( pH: 8 ) kullanılarak 2 saat 37 °C*da preinkübe edilerek elde edildi. Mn+2 nin serum prolidazmm aktivitesini T.C. YtelKÖĞRlTOf KÜRÜLÖ23 kez, domuz böbrek prolidazmın aktivitesini 9.5 kez artırdığı tespit edildi. Serum prolidazı için optimum substrat (glisil-prolin) final konsantrasyonu 30 mmol/1 olarak bulunurken, domuz böbrek prolidazı için 40 mmol/1 olarak saptandı. İnsan serum ve domuz böbrek prolidazmın bulunan Km değerleri, glisil-prolin için sırasıyla 13mmol/l ve llmmol/1, alanil-prolin için 14mmol/l ve 12mmol/l olarak tespit edildi. Mn+2 dışındaki metal iyonlarının serum prolidazmı aktive etmediği, domuz böbrek jjrolidazını ise düşük oranlarda aktive ettiği belirlendi. Bu sonuçlardan enzimin en iyi aktivatör katyonunun Mn+2 olduğu bir kez daha anlaşıldı. EDTA, ÎAA ve p-CMBA'in hem serum hem de domuz böbrek prolidazının aktivitesini inhibe ettikleri, bu inhibisyonun da preinkübasyon aşamasında inkübasyon aşamasına nazaran daha fazla olduğu belirlendi. Sonuç olarak;enzimin kolay ve doğru ölçümü ile optimal deney koşullarının ve özelliklerinin bilinmesinin bu konuda yapılacak daha ileri çalışmalara ışık tutacağı kanısındayız. Anahtar kelimeler : Serum prolidaz, domuz böbrek prolidaz, kinetik özellikler, inhibisyon T.r*. vAtrcnvJUı