Valeriana phu ve V. tuberosa türlerinden antienflamatuvar ve sitotoksik etkili bileşiklerin izolasyonu ve yapı tayini

Bu tez çalışmasında, Valeriana phu ve V. tuberosa türlerinden antienflamatuvar aktivite yönlendirmeli fraksiyonlama ile antienflamatuvar ve sitotoksik etkili bileşiklerin izole edilmesi ve etki mekanizmalarının in vitro ve in silico yöntemlerle aydınlatılması amaçlanmıştır. Ham EtOH ekstreleri, alt ekstreler ve fraksiyonlar LPS ile uyarılmış RAW 264.7 hücrelerinde NO inhibitör aktiviteleri açısından araştırılmıştır. Aktif fraksiyonlardan, dokuzu yeni olmak üzere, phuozit I–III (2, 7, 10), valephuozit (4), phuol (14) ve valtuberozit I–IV (21, 22, 24, 27), toplam 28 sekonder metabolit izole edilip yapıları NMR ve HRESIMS ile aydınlatılmıştır. Bileşiklerden 1, 2, 5, 7, 11, 12, 1417, 19, 20, 24, 25 ve 28, nitrit salınımını 14.94–95.71 µM aralığındaki IC50 değerleri ile azaltmıştır. Ayrıca, bileşiklerin etki mekanizmaları ELISA, Western blot, qRT-PCR, immünfloresan boyama yöntemleriyle aydınlatılmış ve etkinlikleri moleküler modelleme çalışmalarıyla desteklenmiştir. Bileşiklerden 1, 1517, 19, 25 ve 28, TNF-α, IL-1β, IL-6, PGE2 ve COX-2'de önemli bir azalma gösterirken, 1, 15 ve 25, RAW 264.7'de iNOS ekspresyonunu azaltmıştır. Ayrıca, 25 cox2, tnfα, il1b ve il6 mRNA ekspresyonlarını ve NF-κB'nin nükleer bölgeye translokasyonunu anlamlı şekilde inhibe etmiştir. Ek olarak, bu bileşik in silico analizlerde iNOS'a karşı en yüksek bağlanma afinitesini göstermiştir. Önemli antienflamatuvar etkiye sahip bileşikler ayrıca MCF-7, MDA-MB-231, U87, A172, MIA PaCa-2, PANC-1, Mahlavu ve Hep3B kanser hücre hatlarına karşı sitotoksisite potansiyelleri açısından incelenmiş ve hücre ölüm mekanizmaları aydınlatılmıştır. Bileşiklerden 1416 ve 19 A172, Hep3B, MIA PaCa-2 ve PANC-1'de (IC50 18.3–25.4 µM) hücre döngüsünü özellikle G2/M fazında durdurarak ve apoptozu indükleyerek önemli sitotoksik etki göstermiştir.