Kalp krizinin ve kalp yetmezliğinin hızlı tespiti için tanı kiti geliştirilmesi

Kalp krizi ve kalp yetmezliğinin görülme sıklığı gelişmiş toplumlarda azalırken gelişmemiş ve gelişmekte olan toplumlarda artmaktadır. Bunun başlıca sebebi gelişmiş ülkelerdeki tanı ve tedavi sistemlerinin gelişmiş ve daha kolay ulaşabilir durumda olmasıdır. Kalp krizi ve yetmezliğinin tanısında, yüksek isabet oranı ile tanının konması ve hastanın yönlendirileceği polikliniğin belirlenmesi, özellikle acil servisler başta olmak üzere tüm poliklinikler için önemlidir. Halka açık alanlarda, ambulans, otobüs, uçak gibi taşıtlarda ve hatta her bireyin cebinde bulunabilecek ve hızlı bir şekilde sonuç verebilen tanı kitlerinin varlığı doğru zamanda doğru müdehalenin yapılması ile sonuçlanıp hayatta kalım oranlarının iyileştirilmesini sağlayacaktır. Bu çalışmada in vitro immünizasyon ile elde edilen hibridoma klonları karakterize edildi ve ürettikleri anti-hFABP monoklonal antikorları ve anti-NT-proBNP monoklonal antikorları kullanılarak yanal akış prensibi ile çalışan tanı kitleri tasarlandı. Tasarlanan kitlerinin tespit limitleri PBS içinde hazırlanan protein çözeltileri için sırasıyla 10 ng/mL ve 1000 ng/mL olarak belirlendi. Tanı kitlerinin hassaslaştırılması adına lokalize yüzeysel plazmon salınımı (LSPR) prensibi ile çalışan, hem 96 gözlü mikropleyt formatında hem de taşınabilir tek kullanımlık mikroakışkan çip formatında kitler tasarlandı. Elde edilen bu kitlerin hassasiyeti PBS'te ve insan serumunda hazırlanmış protein çözeltileri ile yapılan denemeler ile belirlendi ve sırasıyla PBS için de hFABP 1 pg/mL, NT-proBNP 100 pg/mL; serumda hFABP 10 pg/mL, NT-proBNP ise 1 pg/mL konsantrayonlarda dahi tespit edilebildi. Taşınabilir tek kullanımlık mikroakışkan çipler için yapılan deneme ise kitlerin PBS içinde hazırlanan hFABP ve NT-proBNP çözeltilerini 10 pg/mL konsantrasyonlarda dahi tespit edebildiği gösterildi.