Karaciğer hücrelerinde in vitro olarak test edilmiş etkin antioksidan bitkisel preparatların eldesi

Alkol (etanol) tarihi yazılı kaynaklar ışığında ilk keşfedilen psikofarmakolojik ajandır. Bu nedenledir ki bağımlılık yapıcı maddeler içerisinde en çok kullanılanlardan biridir. Alkol kullanımı birçok hastalığa yol açabilmekle beraber bunların içerisinde en çok karaciğer üzerinde meydana getirdiği toksik etkiler dikkat çekmektedir. Geçmişte ve günümüzde birçok bitkinin kendisi veya tohumlarının farklı hastalıkların tedavisinde kullanıldığı bilinmektedir. Gerçekleştirilen bu tez çalışması kapsamında süperkritik karbondioksit ekstraksiyonu ile elde edilen Nigella sativa (çörek otu) tohum yağları kullanılarak farklı içerikte nanoemülsiyonlar (A1 ve A2 formülasyonları; sırasıyla GSH içeren ve içermeyen) hazırlandı. Nanoemülsiyonların çeşitli içerik ve karakterizasyon testleri yapıldıktan sonra alkol hasarına uğratılmış, normal yetişkin karaciğer epitel hücrelerinin fenotipik karakteristiklerini sergileyen ve tümörijenik olmayan THLE-2 hücre hattı üzerinde söz konusu hasarın önlenmesi ve giderilmesine yönelik bir dizi in vitro hücre kültürü çalışmaları gerçekleştirildi. Bağımlılık alanında, özellikle hepatoprotektif aktivitesi yüksek olan çıktıların elde edilmesi amacıyla gerçekleştirilen bu çalışma sonucunda umut vaadedici sonuçlar elde edildi. Deneysel aşamada ilk olarak hazırlanan nanoemülsiyonların içerik analizleri ve karakterizasyon çalışmaları gerçekleştirildi. Ardından in vitro hücre kültürü denemelerinde kullanılacak nanoemülsiyon dozları 0,5 mg/mL olarak belirlendi. Devamında, nanoemülsiyonların in vitro hücre kültürü koşullarında yara kapama, proliferasyon, antioksidan aktivite ve floresans görüntüleme çalışmaları gerçekleştirildi. Çalışmanın ana hedefi olan, nanoemülsiyonların hepatoprotektif aktivitesi araştırılırken, THLE-2 hücreleri farklı süreler ve derişimlerde etanole maruz bırakılarak çalışma boyunca kullanılacak etanol derişimi 400 mM olarak belirlendi. Ardından belirlenen nanoemülsiyon dozlarının koruyucu etkilerini görmek amacıyla 2 saat, 0,5 mg/mL nanoemülsiyon ön uygulamasına tabi tutulan hücrelere 48 ve 72 saat süreyle 400 mM etanol uygulanarak canlılık tayini yapıldı. Elde edilen sonuçlar doğrultusunda hem A1 hem de A2 formülasyonlarının model olarak kullanılan THLE-2 hücre hattı üzerinde hepatoprotektif etkisi gösterilmiş oldu.