Katalazın eupergit, florisil ve cam desteklere kovalent olarak immobilizasyonu ve karakterizasyonu

Sığır karaciğer katalazının aktifleştirilmiş florisil, gözeneksiz cam boncuklar (NPG), gözenekleri kontrollü cam boncuklar (CPG) ve Eupergit C ve Eupergit C 250L'ye kovalent olarak immobilizasyonu araştırılmıştır. Ayrıca katalazın florisile ve CPG'ye immobilizasyonunda 1,4 bütandiol diglisidil eter (1,4 BDDGE), polietilen glikoldiglisidil eter (PEGDGE), 5-aminopentanoik asit (5-APA) ve 6-amino hekzanoik asit (6-AHA) ara kollarının kullanımlarının immobilize katalazın aktivitesi üzerine etkileri incelenmiştir. Katalazın tüm desteklere immobilizasyonunda en uygun immobilizasyon koşulları (pH, tampon derişimi, başlangıç katalaz derişimi, sıcaklık ve immobilizasyon süresi) ve immobilize katalaz örneklerinin en yüksek aktivite gösterdikleri koşullar (pH, tampon derişimi ve sıcaklık) belirlenerek kinetik parametreleri (Km, Vmax, kcat/Km, Ea) bulunmuştur. Ayrıca immobilize katalaz örneklerinin taramalı elektron mikroskobunda görüntüleri incelenmiştir. İmmobilize katalaz örneklerinin termal kararlılıkları, depolama kararlılıkları, kesikli ve sürekli reaktörlerde kullanımları araştırılmıştır.Tüm immobilize katalaz örnekleri arasında en yüksek katalitik etkinlik (kcat/Km) 1,7x106 s-1M-1 olarak gözenek büyüklüğü 70 nm olan CPG'ye doğrudan immobilize edilen katalaz örnekleri için bulunmuştur. 50ºC'de yarı ömrü (t1/2) uzun ilk üç immobilize katalaz sırasıyla florisile doğrudan (6,2 sa.), CPG'ye doğrudan (5,2 sa.) ve Eupergit C'ye (4,8 sa.) immobilize edilen katalaz örnekleridir. CPG'ye ve Eupergit C'ye immobilize edilen katalaz örneklerinin 5ºC'deki depolama kararlılıklarının diğerlerinden daha yüksek olduğu belirlenmiştir. CPG'ye doğrudan immobilize edilen katalaz örneklerinin başlangıç aktivitelerinin % 50'si kalıncaya kadarki koşullar için sürekli reaktördeki en yüksek aktivite toplamının (69,7x105 U/g immobilize katalaz) kesikli reaktördeki en yüksek aktivite toplamından (6,2x105 U/g immobilize katalaz) 11 kat daha fazla olduğu saptanmıştır.Katalazın immobilizasyonu için kullanılan destekler arasından en uygun desteğin CPG, en uygun immobilizasyon yönteminin CPG'ye doğrudan immobilizasyon olduğu ve CPG'ye doğrudan immobilize edilen katalaz örneklerinin özellikle sürekli reaktörde kullanılmalarının daha uygun olduğu sonucuna varılmıştır.