Kültür Avrupa deniz levreği (Dicentrarchus labrax) sindirim kanalından tripsin ile kimotripsinin saflaştırılması ve karakterizasyonu

Balıkların sindirim sistemi hidrolitik enzimler bakımından oldukça zengindir. Bu enzimler gelişmiş ülkelerde gıda, kozmetik, deri ve tekstil gibi endüstrilerde yüksek katma değerli ürün olarak kullanılmaktadır. Bu sebeple ülkemizde en çok üretilen balık türü olan Avrupa deniz levreği (Dicentrarchus labrax) pilorik seka ve sindirim kanalından tripsin ve kimotripsin enzimlerinin saflaştırılarak farklı çevre koşullarına dayanıklılığı belirlenmek istenmiştir. Avrupa deniz levreğinden tripsin enzimi 52.71 kat saflaştırılmış olup, %8.60 verimlilik oranına sahiptir. Enzimin molekül büyüklüğü SDS-PAGE analizi ile 24 kDa olarak tespit edilmiştir. Tripsin enzimi n-benzoil-dl-arginine-p-nitroanilide substrat olarak kullanılarak, pH 8.0 ve 55ºC'de optimal aktivite göstermiştir. Aynı zamanda aktivitesinin 50 ºC'den sonra %30 ve fazlasını, 70 ºC'de tamamını kaybetmiş; pH 7.0-10.0 arası en iyi stabiliteyi göstermiştir Yine aynı balıktan kimotripsin enzimi 67.05 kat saflaştırılmış, %8.46 verimlilik oranı elde edilmiştir. Enzimin molekül büyüklüğü 29 kDa olarak tespit edilmiştir. Kimotripsin enzimi n-succinyl-ala-ala-pro-phe-p-nitroanilide substrat olarak kullanılarak, pH 9.0 ve 50 ºC'de optimal aktivite göstermiştir. Ayrıca 50 ºC'den sonra aktivitesinin %40 ve fazlasını, 70 ºC'de tamamını kaybetmiş; pH 7.0-10.0 arası yüksek stabilite göstermiştir.