Pregnenolon bileşiğinin Aspergillus glaucus küfü ile biyotransformasyonu

Bu çalışmada pregnenolon (2) bileşiğinin Aspergillus glaucus MRC 200914 küflünde nasıl metabolize edildiğinin incelenmesi hedeflenmiştir. Biyotransformasyon deneyi öncesinde Aspergillus glaucus MRC 200914 küfü için periyodik olarak taze alt kültürler tazelendi ve sonrasında küf için besiyeri hazırlanıp erlenlere dağıtılıp otoklavda sterilize edildi. Bu erlenlere en taze alt kültürdeki küf steril şartlarda ilave edilerek erlenler 3 gün inkübasyona bırakıldı. Daha sonra bu erlenlere ise pregnenolon (2) steril şartlarda ilave edilerek 5 gün inkübe edildi. İnkübasyon sonrasında besiyeri filtre edildi. Filtrattaki steroidler etil asetat ile ekstrakte edilerek organik faza çekildi. Ekstraktlarının evaporatörde uçurulması ile elde edilen kalıntıdaki steroidler kolon kromatografisi ile ayrıldı. Steroidlerin yapı tayinleri ise erime noktaları tayini, NMR ve IR spektroskopisi gibi yöntemler ile gerçekleştirildi. Aspergillus glaucus ile pregnenolon (2) biyotransformasyonu 3β,7α-dihidroksipregn-5-en-20-on (14) ve 3β,7α,11α-trihidroksipregn-5-en-20-on (15) steroidleri ile sonuçlandı.