RHO kinaz yolağının coronavirüs enfeksiyonundaki rolünün araştırılması

Coronavirüsler (CoV) insanlar başta olmak üzere birçok memelilerde ve kuşlarda solunum sistemi, gastrointestinal ve sistemik hastalıklara sebep olmaktadırlar. Coronavirüsler insanlarda genellikle solunum sistemi hastalıkları ile ilişkilendirilmişlerdir. Coronavirüsler, 2002-2003 yılları arasında patlak veren ve yüzlerce insanın ölümüne sebep olan şiddetli akut solunum yolu yetersizliği sendromu (SARS) salgını ile insan sağlığı için tehdit oluşturmaktadırlar. Öte yandan SARS-CoV salgınından sonra yeni insan coronavirüsleri tanımlanmıştır ve bu virüsler insan sağlığı için büyük tehdit unsurudur. Rho kinaz uyarı iletim yolağı başta hücre iskeletinin şekillenmesi ve düzenlenmesi olmak üzere kesecik trafiğinin düzenlenmesi, hücre şekillenmesi, hücre döngüsünün düzenlenmesi, hücre bölünmesi, hücre göçü, adezyonu ve farklılaşması gibi birçok hücresel olayın gerçekleşmesinde etkin rol almaktadır. Yapılan çalışmalarda Rho kinaz uyarı iletim yolağı herpes virüsler başta olmak üzere birçok virüs enfeksiyonu ile ilişkilendirilmiştir. Virüsler, Rho kinaz yolağı bileşenlerine etki ederek hücre iskeletinin düzenlenmesine etki etmekte ve enfeksiyonlarını kolaylaştırmaktadırlar. Bu çalışmada Rho kinaz uyarı iletim yolağının Coronavirüs enfeksiyonundaki rolünün araştırılması amaçlanmıştır. Bu çalışmada ifade plazmid pMHVR ile transfekte edilmiş HeLa-CEACAM hücre hattı ve moleküler tabanlı Coronavirüs çalışmalarında model olarak kullanılan MHV-A59 fare Coronavirüsü kullanılmıştır. Rho kinaz uyarı iletim yolağı ile ilişkili olduğu bilinen 32 genin mRNA seviyelerine Nano teknoloji temelli yüksek kapasiteli Real-Time PCR olan Fluidigm BioMark? HD Sistem ile bakılmıştır. Yapılan bu çalışmada, ilginç şekilde CoV enfeksiyonu sonucu taranan genlerin çoğunun ifade seviyelerinde anlamlı bir farklılık saptanamamıştır. Ancak, 6 saat coronavirus enfeksiyonuna maruz bırakılmış hücrelerde kontrol grubuna kıyasla Rho GDP ayrışma inhibitörü gama (RhoGDI?) genin ifade seviyesinde dört kat azalma gözlenmiştir.