Comparison of mitogen-induced lymphocyte proliferation values in healthy pediatric and adult age groups

Antijene yanıtlı lenfosit klonlarının prolifere olması, kazanılmış yanıtların ilk basamağı olup immün hücrelerin efektör fonksiyonlarını gerçekleştirebilmesi için önem taşımaktadır. İmmünolojik araştırmalar ve immün tanıda proliferasyon testlerinin kullanımı günden güne yaygınlaşmakta olup bu çalışmalarda sağlıklı kontrol olarak erişkin kanlarının kullanılabilirliği soru işaretidir. Bu çalışmanın amacı, pediyatrik ve erişkin sağlıklı kontrol gruplarında T lenfosit, B lenfosit ve total lenfositlerin mitojenlerle uyarılmış proliferasyon değerlerini karşılaştırmaktır. Çalışmaya 20 erişkin ve 19 pediyatrik birey katıldı. Gönüllülerden alınmış taze periferik kan örneklerinden periferik kan mononükleer hücreleri, fikol konsantrasyon gradyanı yöntemi ile saflaştırıldı, CFSE ile işaretlenen mononükleer hücreler, PHA ve CD2/CD3/CD28 monoklonal antikor kokteyli (CD-mix) ile 120 saat, 37C, %5 CO2'li hücre kültürü ortamında uyarıldı. Kültür aşamasını takiben CD4+ T ve CD19+ B hücreleri, kendilerine özgül monoklonal antikorlarla işaretlenerek bu hücrelerin ve işaretlenmemiş total mononükleer hücrelerin proliferasyon değerleri akan hücre ölçer cihazı kullanımı ile belirlendi. Çalışmanın sonucları, pediyatrik ve erişkin yaş gruplarında, PBMC, CD4+ T ve CD19+ B hücrelerinin, mitojen uyarımı altında genelde benzer davranışlara sahip olduğunu, PHA uyarısı altında pediyatrik CD4+ T hücrelerinin, erişkinlere göre anlamlı derece yüksek çoğaldıklarını (p=0,012) göstermiştir. Pediyatrik bireyler yaş gruplarına göre incelendiğinde, 0-2, 3-5 ve 6-18 yaş arası mitojen yanıtlarının benzerliği gözlenmiştir. Bu bulgular, pediyatrik hasta örnekleri için erişkin kontrol kan örneklerinin kullanılabilirliğini düşündürmektedir Anahtar Kelimeler: Akan hücre ölçer, proliferasyon, mitojen, lenfosit, hücre kültürü Bu çalışma, İstanbul Üniversitesi, Bilimsel Araştırma Projeleri Birimi tarafından