Sterilizasyon kontrolü için biyolojik indikatör üretimi

Bu tez çalışmasında ülkemizde yerli üretimi gerçekleştirilmeyen ve ithalatı zorunlu olan sterilizasyon süreç kontrol kiti olan biyolojik indikatörlerin yerli üretimini gerçekleştirmek hedeflenmiştir. Biyolojik indikatör olarak kullanılan seçilmiş mikroorganizma sporlarının stoklarının hazırlanması, uygun prosedürlerle geliştirme, kültüre alma, spor üretimi, saflaştırma ve spor yaşamı sürdürülmesi basamaklarından oluşmaktadır. Stok spor süspansiyonları, besleyici özelliği bulunmayan bir ortamda tutulan çoğunlukla pasif ve çoğalmayan spor formlarından oluşmaktadır. Bacillus atrophaeus ATCC 9372 bakterisinin sıvı kültürde optimum büyüme ve sporulasyon ortamının belirlenmesi için optimize edilen değişkenler: soya unu, mısır ıstaltma şurubu, maya ekstraktı, stok mineral solüsyonu, sıcaklık, pH, ZnSO4, K2HPO4, KH2PO4 ve glikozdur. Design Expert 7 programı ile Placket Burman metodu ile yapılan tarama çalışmasında 11 değişken değerlendirilmiştir. Soya unu, mısır ıslatma şurubu, maya ekstraktı, ve stok mineral solüsyonu değişkenlerinin optimize edilmesine karar verilmiştir. Yanıt yüzey yöntemi (RSM) için deney tasarımı olarak merkezde 6 tekrarı içeren faktöriyel merkezi kompozit tasarımı (CCD) uygun görülmüştür. RSM sonucuna göre program 39,8 g/L soya unu, 30 g/L mısır ıslatma şurubu, 1 g/L maya ekstraktı ve 1mL/L stok solüsyonu formülasyonunu optimum olarak vermiştir. Elde edilen spor sayısı 4,1x108 spor/mL olmuş ve biyolojik indikatör üretimi için yeterli görülmüştür.