Termofilik Bacillus izolatlarınca üretilen alfa-amilaz enzimlerinin kısmi karakterizasyonu

Bu çalışmada, Çukurova Üniversitesi kampüs alanı içinden alınan toprak numunelerinden üç adet termofilik Bacillus sp. bakterisinin izolasyonu gerçekleştirilmiştir. İzole edilen bakteriler sırasıyla Bacillus sp. izolat SD1, SD2 ve SD3 olarak adlandırılmıştır. Bakteriler tarafından üretilen α-amilaz enzimlerinin izolasyonu ve kısmi karakterizasyonu gerçekleştirilmiştir. Enzimlerin optimum aktivite gösterdiği sıcaklık değerleri SD2 ve SD3 izolatları için 50 ℃, SD1 izolatı için ise 40 ℃ olarak belirlenmiştir. SD1 α-amilazı optimum aktivitesini 8.0 pH değerinde gösterirken, SD2 ve SD3 α-amilazları 6.0 pH değerinde göstermişlerdir. Bakterilerin besiyerlerine inokülasyonlarından itibaren SD2 α-amilazı 24. saatte en yüksek aktivite seviyesine ulaşırken, SD1 ve SD3 α-amilazları 48. saatte ulaşmışlardır. Her üç enzim de 30 ve 40 ºC'de 15 dk. ön inkübasyon sonrasında aktivitelerini tamamen korumuşlardır. 50 ºC'den sonra ise 15 dk ön inkübasyon sonrasında kalan aktivite kayıpları meydana gelmiş, 100 ºC'de ise aktivitelerinin büyük bir kısmını kaybetmişlerdir. Kimyasal maddelerden Ca, Mg ve Co her üç enzim üzerinde de değişik oranlarda stimülatör etki ortaya koyarken, K ve EDTA inhibisyon etkisi göstermiştir. 16S rDNA dizileme analizi Bacillus sp. SD1 ve SD2 suşunun suşunun büyük oranda benzerlik gösterdiğini ortaya koymuştur. Anahtar Kelimeler: Bacillus sp., alfa-amilaz, izolasyon, karakterizasyon