Trabectedın'in insan glioblastoma hücre kültürlerindeki apoptotik ve otofajik etki mekanizmalarının araştırılması

Glioblastoma yetişkinlerde en sık rastlanan beyin tümörüdür. Tümörün aşırı invazif karakteri, beyindeki lokalizasyonu, kan beyin bariyeri ve hücrelerin kemoterapi/radyoterapiye karşı doğal direnci, standart tedavi seçeneklerine yanıt oluşumunu engellemekte ve kötü prognoza neden olmaktadır. Bu nedenle, glioblastoma tedavisinde yeni yaklaşımların geliştirilmesine ihtiyaç vardır. Günümüzde kanser tedavisi için klinik kullanım onayı almış yalnızca 4 adet denizel kaynaklı antikanser ilaç bulunmaktadır. Bunlar arasında en umut vadedici olarak bilinen Trabectedin, yumurtalık ve sarkoma tümörlerinin klinik tedavisinde kullanılmaktadır. Bu çalışmanın amacı, glioblastoma hücre kültürlerinde Trabectedin ile indüklenen hücre ölüm mekanizmalarının detaylı olarak aydınlatılmasıdır. Apoptotzis'in gösterilmesinde DNA fragmentasyonu, kaspaz 3/7 aktivitesi, TMRE/Hoechst ve Annexin V/7-AAD boyamaları, Kaspaz 8 / 9 inhibitörleri ve iç/dış apoptotik yolakta rol oynayan proteinlerin ekspresyon düzeyleri araştırıldı. Otofajinin araştırılması için MDC boyaması, LC3-I/II dönüşümü, SQSTM1/p62 ve Beclin1 ekspresyon düzeyleri ölçüldü. p53 ailesi üyelerinin Trabectedin aracılı hücre ölümü üzerindeki rolleri siRNA ve spesifik inhibitörler ile araştırıldı. Trabectedin'in apoptozis ve otofaji arasındaki önemli etkileşimlerden biri olan Bcl-2/Beclin-1 dimerizasyonu üzerindeki etkisi co-immunopresipitasyon yöntemiyle araştırıldı. Trabectedin'in T98G hücre kültürlerinde hem iç hem de dış yolağı aktive ederek apoptozisi indüklediği belirlendi. Bu apoptotik etkinin p63 aracılı olarak gerçekleştiği saptandı. U-87 MG hücrelerinde ise, otofajinin indüklendiği ve otofajinin p53 aracılı olarak gerçekleştiği belirlendi. Bcl-2/Beclin-1 dimerizasyonunun Trabectedin etkisiyle her iki hücre kültüründe de ayrıldığı gösterildi. Sonuç olarak, bu preliminer çalışma Trabectedin'in GBM tedavisi için umut vadedici bir aday olabileceğini göstermektedir. Trabectedin'in apoptotik ve otofajik etkilerinin in vivo GBM modellerinde araştırılacağı çalışmalara ihtiyaç vardır.