Trichoderma atroviride'den elde edilen kitinazın kısmi saflaştırılması

ÖZETKitinazlar [E.C.3.2.1.14], β-1,4-bağlı N-asetil-D-glukozaminin doğrusal bir homopolimeriolan kitini hidroliz eden enzimlerdir. Kitin birçok alg ve mantarın hücre duvarlarınınböceklerin ve eklembacaklıların dış iskeletlerinin, deniz omurgasızlarının kabuklarının, temelbileşenidir.Kitin ve kitinolitik enzimler biyoteknolojik uygulamalar için büyük bir öneme sahiptir.Özellikle, kitinazlar bitki patojenlerini kontrol amaçlı tarımda kullanılırlar. Kitinazlar vekitinin enzimatik hidrolizi ile oluşan kitooligomerler aynı zamanda insan sağlığınınkorunmasında kullanılabilirler. Farklı açılardan kitinazların kullanımındaki başarı makulmaliyette yüksek aktiviteli preparasyonların elde edilmesine bağlıdır. Bu nedenle, kitinolitikenzimlerin genetik ve biyokimyasının, filogenetik akrabalıklarının ve değerlendirmemetotlarının anlaşılması, bu enzimleri yakın gelecekte çeşitli proseslerde kullanılabilirkılacaktır.Kitinin yıkımı ve kitinazlar, biyolojik ve biyoteknolojik proseslerin geniş bir kısmında önemlibir yere sahiptir. Kitin artıklarının çevresel temizliğinden, insan hastalıklarının tedavisine,bitki savunma sistemlerine ve biyolojik kontrole kadar uzanan birçok alanda önemesahiptirler. Bu nedenlerle bitki biyokontrolünde sıkça kullanılan bir küf mantarı olanTrichoderma atroviride'nin ürettiği kitinaz enzimi incelendi. Patates-dekstroz agar üzerindeyetiştirilen T. atroviride'den kitinaz indüksiyonu, Dana ve arkadaşlarının önerdiği sıvıbesiyerinde sağlandı. T. atroviride'nin yer değiştirme yöntemi kullanılarak, %0.1 kolloidalkitin içeren sıvı besiyerinde, 30 ºC'de 48 saat boyunca çalkalamalı inkübasyonu sonucumaksimum kitinaz aktivitesi elde edildi. Kitinaz enzimine amonyum sülfat tuzu, etanol,aseton ve trikloroasetik asit gibi farklı çöktürme yöntemlerinin etkisi incelendi.Anahtar kelimeler: Kitinaz, Trichoderma atroviride, enzim aktivitesi, saflaştırma..i