In vitro effects of some plants which are used in traditional medicine in Turkey on several ınflammatory parameters

Sambucus ebulus L. S. nigra L., (Caprifoliaceae) ve Cistus laurifolius L. (Cistaceae) bitkilerinin yaprakları Türkiye'de halk arasında enflamatuvar durumlara karşı kullanılmaktadır. Bitkiler üzerinde yürütülen önceki çalışmalar, bu bitkilerin in vivo potent antienflamatuvar etkilere sahip olduğunu göstermiştir. Bu çalışmanın amacı bu bitkilerin etki mekanizmalarını açıklamak amacıyla, çeşitli enflamasyon parametreleri üzerindeki etkilerini in vitro metotlar kullanarak ortaya koymak ve aktivite yönlendirmeli fraksiyonlama tekniği ile etkili bileşenleri izole etmektir. Lipopolisakkarit (LPS) ile indüklenmiş Raw 264.7 makrofaj hücrelerinin nükleer faktör-kappa B [NF-κB] inhibisyonuna dayanan aktivite modeli kullanılarak hazırlanan ekstrelerden etkili aktif bileşenler izole edilmiş ve yapıları spektroskobik yöntemler ile aydınlatılmıştır. S. ebulus bitkisinden; flavonoit yapısında (izoramnetin-3-O-β-D-glukopiranozit, izoramnetin-3-O-rutinozit, kersetin-3-O-β-D-glukopiranozit, kersetin-3-O-β-D-galaktopiranozit) ve iridoit yapısında iki yeni bileşik; Sambulin A ve Sambulin B elde edilmiştir. S. nigra ve C. laurifolius'un aktif bileşenleri olarak ise, sırasıyla, bir sterol karışımı (SNH-1) ve kalan su alt ekstresi (CL-R-H2O) belirlenmiştir. Ayrıca tanımlanan aktif molekül veya fraksiyonların enflamatuvar mediyatörler [TNFα, IL-1α, IL-1β, IL-2 ,IL-6, PGE2 (ELIZA)], ve nitrik oksit (Griess Yöntemi) üzerindeki etkileri incelenmiştir. Protein seviyeleri (iNOS/COX-2) ve protein fosforilasyonları [Mitojen Aktive Protein Kinazlar (MAPK) ve kappa B protein inhibitörü (IκBα)] üzerindeki etkiler Western Blot yöntemiyle araştırılmıştır. Sonuç olarak, izole edilen flavonoitlerden; izoramnetin-3-O-β-D-glukopiranozit ve izoramnetin-3-O-β-rutinozit NO, iNOS, TNFα üretimini inhibe etmiştir. İzoramnetin-3-O-β-rutinozit ayrıca PGE2 ve COX-2 inhibisyonu da sağlamıştır. Her iki flavonoit p38/IκBα fosforilasyonlarını inhibe etmiştir. İridoit tipi bileşikler iNOS/COX-2 seviyelerini baskılamış NO/ PGE2 ve TNFα üretimlerini azaltmış, JNK ve IκBα fosforilasyonlarını engellemiştir. Diğer taraftan SNH-1 ve CL-R-H2O aktif fraksiyonları NO, PGE2 seviyeleri ile JNK ve IκBα fosforilasyonlarını inhibe etmiştir.