Biyoterapötik Ürünler Araştırma ve Geliştirme Anabilim Dalı
Ankara Yıldırım Beyazıt University3
Arşivlenen Tez
0
DOI Atanmış
0%
DOI Oranı
Anabilim Dalı
Bolanthus turcicus Koç & Hamzaoğlu ve yakın türlerintaksonomisi, fitokimyasal içeriği ile pankreaskanser hücre hattı üzerindeki etkilerininaraştırılması
Pankreas kanseri, özellikle erken teşhis zorluğu, agresif seyri ve mevcut tedavi seçeneklerine karşı direnci nedeniyle ciddi bir sağlık sorununu temsil etmektedir. Bazı bitkiler, kanserle mücadelede potansiyel yararlar sunabilir. Özellikle antioksidanlar, antienflamatuvar bileşenler ve kanser hücrelerinin büyümesini engelleyebilen maddeler içeren bitkiler, kanser riskini azaltmada veya tedavi destekleyici olarak kullanılabilir. Bu tez kapsamında, Bolanthus turcicus Koç & Hamzaoğlu 'un farklı çözücü ekstrelerinin HUC-F ve MIA PaCa-2 hücreleri üzerindeki sitotoksik etkileri MTT Kolorimetrik Yöntemi ile belirlenmiştir. Potansiyel antikanser aktivitesine sahip olan B. turcicus bitki ekstrelerinin HUC-F ve MIA PaCa-2 hücre hatları üzerindeki sitotoksik etkisi, scratch çizik testi ve hücre sağkalımı ikili boyama (DAPI-F-ACTIN) analizi ile doğrulanmıştır. Daha sonra, potansiyel antikanser aktivitesine sahip olan B. turcicus ekstrelerinin apoptotik aktivitesi florometrik (Kaspaz 3 aktivasyonu analizi) ve moleküler (qRT-PCR analizi) olarak değerlendirilmiştir. MTT analizi sonuçlarına göre, 24. saatte elde edilen verilere göre B. turcicus ekstresinin sağlıklı hücre hattı HUC-F üzerindeki düşük sitotoksisite ve pankreas kanseri hücre hattı MIA PaCa-2 üzerindeki seçici yüksek sitotoksisite göstermiştir. B. turcicus'un metanol, kloroform, n-hekzan, etil asetat ve su ekstreleri elde edilmiş ve bu ekstrelerin antioksidan v kapasitesi Toplam Fenolik Madde, Toplam Flavonoit Madde, ABTS, DPPH, FRAP deneyleri ile ölçülmüştür. Yapılan deneyler sonucunda metanol ekstresinin en yüksek antioksidan aktiviteye sahip olduğu belirlenmiştir. Ayrıca, bitkinin fitokimyasal içeriği YPSK ve LC-MS-QTOF analizleri ile belirlenmiştir. Türkiye'ye endemik olan 6 Bolanthus taksonu üzerinde yapılan kök, gövde ve yaprak anatomisi incelenmiştir. Kök anatomisinde peridermis, korteks, ksilem ve floem yapıları gözlenmiş, kök peridermisi içinde dikdörtgen fellem hücrelerinin yer aldığını ve korteksin düzenli oval veya dikdörtgen parankimatik hücrelerden oluştuğu belirlenmiştir. Gövde anatomisinde epidermis, korteks, sklerankima, floem, ksilem ve öz yapıları gözlemlenirken, epidermis tabakasının tek sıralı düzenli dikdörtgenimsi hücrelerden oluştuğu ve sık tüylerle kaplı olduğu belirlenmiştir. Gövde de yoğun druz kristalleri gözlenmiştir. Yaprak anatomisinde ise epidermis, mezofil ve iletim demetleri gözlemlenmiş; epidermisin üst ve alt yüzeyinde tek sıralı düzenli dikdörtgen, kare ve oval hücrelerin bulunduğu, mezofil dokusunun ekvifasiyal tipte olduğu ve iletim demetlerinin orta kısımlarda yer aldığı belirlenmiştir. Yaprak orta damarında yoğun druz kristalleri gözlenmiştir.
Apis mellifera (bal arısı) zehrinin kimyasal profiline farklı kurutma tekniklerinin etkisi
Arı zehri, melittin, apamin, histamin ve çeşitli biyolojik aktif peptitler gibi bileşenleri içeren ve anti-inflamatuar, antimikrobiyal, antioksidan özellikleriyle tanınan değerli bir karışımdır. Bu özelliklerinden dolayı arı zehri, farmasötik ve kozmesötik endüstrilerde geniş bir kullanım potansiyeline sahiptir. Ancak, bileşenlerinin ısıya ve çevresel koşullara karşı hassasiyeti nedeniyle arı zehrinin etkinliğini korumak için uygun kurutma yöntemlerinin belirlenmesi kritik bir öneme sahiptir. Yanlış kurutma süreçleri, zehrin biyolojik aktivitesini azaltarak melittin gibi temel bileşenlerin bozulmasına yol açabilmektedir. Bu çalışmada, arı zehrinin biyolojik aktivitesinin korunması amacıyla üç farklı kurutma yöntemi—standart kurutma, liyofilizasyon ve infrared (IR) fırın kurutma—kullanılarak kurutma verimliliği değerlendirilmiştir. IR fırında kurutma sürecinde ise IR-A, IR-B ve IR-C lambaları kullanılmıştır. Kurutma işlemi sonrası elde edilen arı zehri numunelerinde nem içeriği, melittin miktarı, antioksidan ve anti-inflamatuar aktiviteler analiz edilmiştir. Bulgular, en etkili kurutma yönteminin IR-B lambası altında gerçekleştirilen IR fırın kurutma olduğunu göstermiştir. IR-B ile kurutulan numunelerde nem içeriği düşük, melittin miktarı yüksek bulunmuş ve güçlü antioksidan ile anti-inflamatuar aktivite sergilenmiştir. FTIR ve SEM analizleri de bu bulguları destekleyerek IR-B lambasının arı zehri için optimum kurutma koşullarını sağladığını doğrulamıştır. Bu tez çalışması, arı zehrinin biyolojik aktivitesini koruyacak en uygun kurutma yöntemini belirleyerek biyomateryal hazırlama ve işleme süreçlerine katkı sunmaktadır. Kasım 2024, 110 sayfa Anahtar Kelimeler: Arı Zehri, Apis mellifera, Apiterapi, IR Kurutma, HPLC, Liyofilizasyon
Tıbbi sülük (hirudo verbana) salgı ekstraktının pankreas kanseri hücre hattı (mıa paca-2)'nda in vitro etkisinin araştırılması
Bu çalışmada Hirudo verbana türü tıbbi sülükten alınan salgı ekstratının pankreas kanseri hücre hattı (MIA PaCa-2) üzerindeki in vitro etkisi araştırılmıştır. Tıbbi sülükten elde ettiğimiz salgı ekstraktı -80°C' de 24 saat bekletildikten sonra liyofilizatör cihazında 48 saat tutularak toz haline getirilmiştir. Toz halindeki salgıda öncelikle toplam protein analizi yapılmıştır. İnsandan alınan pankreas kanseri hücre hattının hücre kültürü hazırlanarak otomatik hücre sayım cihazında hücre sayımı yapılmış ve 96 kuyucuklu plaka üzerine hücrelerin ekimi yapılmıştır. Bu hücrelerin üzerlerine çalışmamızda kullanacağımız 75 µg/ml, 150 µg/ml, 300 µg/ml, 600 µg/ml ve 1200 µg/ml doz oranlarında tıbbi sülük salgı ekstraktları eklenmiştir. Hücre canlılığı XTT cihazı kullanılarak ölçülmüştür. 24, 48 ve 72. saatler için ayrı ayrı IC50 değerleri hesaplanmıştır. 24. saatteki IC50 değeri 484,48 µg/ml, 48. saatteki IC50 değeri 330,92 µg/ml son olarak da 72. saatteki IC50 değeri 542,75 µg/ml olarak hesaplanmıştır. Hirudo verbana sülük salgısının MIA PaCa-2 hücre canlılığı üzerine etkisinin lineer olmadığı gözlemlenmiştir. 600 µg/ml konsantrasyonun altındaki dozlarda tıbbi sülük salgı ekstraktlarının pankreas kanseri hücre hattı üzerinde zayıf antiproliferatif etki görülürken 600 µg/ml ve 1200 µg/ml dozlarda ise sitotoksik etki gözlemlenmiştir.