İnsan serumundan L-prolin tespiti için L-prolin spesifik nanopartiküllerin tasarlanması

Amino asitlerin tespiti ve miktarının belirlenmesi gibi süreçler, özellikle metabolik bozuklukların teşhisinde biyokimyasal analizlerde önemli bir rol oynamaktadır. Bu amino asitler arasında, L-Prolin'in, özellikle insanlarda çeşitli metabolik bozukluklarla önemli bir ilişkiye sahip olduğu belirlenmiştir. Hiperprolinemi, L-prolin molekülünün prolin oksidaz veya pirolin-5 karboksilat dehidrogenaz enzimlerindeki eksiklikler nedeniyle etkili bir şekilde parçalanamadığı durumlarda ortaya çıkan bir metabolik bozukluktur, böylece vücut içinde L-Prolin birikmesine neden olur. Hiperprolinemiye sahip bireylerde, kan ve idrarda L-Prolin seviyelerinde belirgin bir artış gözlemlenir, bu da vücut sıvılarında bu seviyelerin doğru bir şekilde ölçülmesinin ve izlenmesinin önemini vurgular. Proteinler, peptitler, amino asitler, iyonlar, vb. hedef moleküllerin yüksek seçicilikle karmaşık ortamlarda tanınma zorluğuna çözüm olarak, moleküler kalıplama, bu işi tek bir adımda başaran güvenilir bir teknik olarak öne çıkar. Bu tez çalışmasında, L-Prolin molekülünü seçici bir şekilde tanıyabilen moleküler baskılanmış nanopartiküller sentezlenmiştir. Hidroksietil metakrilat (HEMA) tabanlı nanopartiküller, emülsiyon polimerizasyon tekniği kullanılarak sentezlenmiştir ve taramalı elektron mikroskobu, zeta-sizer parçacık boyutu analizi, yüzey alanı hesaplamaları ve Fourier Dönüşümü Kızılötesi Spektroskopisi (FTIR) ile karakterize edilmiştir. Zeta-sizer analizi sonuçlarına göre, Pro-MIP ve NIP nanopartiküllerin çapları sırasıyla yaklaşık 27.51 nm ve 20.66 nm olarak belirlendi. L-Prolin'in sulu çözeltilerden nanopartiküllere adsorpsiyonu batch sistemde incelendi ve maksimum L-Prolin adsorpsiyon kapasitesi Pro-MIP için 26.58 mg/g, NIP için ise 4.65 mg/g olarak belirlendi. L-Prolin baskılanmış nanopartiküllerin seçiciliği, yarışmacı moleküller (L-Histidin ve L-Fenilalanin) varlığında Sıvı Kromatografi-İkinci Kütle Spektrometrisi (LC-MS/MS) kullanılarak başarıyla doğrulandı. Son olarak, Pro-MIP'ler tekrarlanan adsorpsiyon-desorpsiyon döngülerine tabi tutuldu ve Pro-MIP'lerin seçici adsorpsiyon kapasitesinde önemli bir azalma olmadan 10 kez kullanılabileceği gösterildi.