Erişkin erkek sıçanlarda kisspeptinin spermatogenezis ve apoptozise etkisinin immünohistokimyasal, ışık ve elektron mikroskopik olarak incelenmesi

Bu çalışmada, erişkin sıçanlara akut ve kronik uygulanan kisspeptinin testis dokusundaki etkilerinin ışık ve elektron mikroskopik ve biyokimyasal olarak incelenmesi amaçlanmıştır.Hipofizden LH ve FSH salgılanmasını uyaran çok güçlü bir nöropeptit olan kisspeptin, bu etkisini GnRH düzeylerini artırarak yapmaktadır. Son yıllarda yapılan çalışmalarda ergenliğe geçişte kimyasal öpücük olarak tanımlanan kisspeptinin üreme işlevlerine etkili olduğu bildirilmektedir.Çalışmada, 1 gün serum fizyolojik (SF), 5 gün SF, 13 gün SF, 1 gün Kisspeptin-10, 5 gün Kisspeptin-10, 13 gün Kisspeptin-10, 13 gün Kisspeptin-10 uygulamasının ardından 7 gün uygulama yapılmadan bekletilen olmak üzere toplam 7 grup oluşturuldu. Ayrı olan SF grupları tek bir kontrol grubu olarak değerlendirildi. 1 ve 5 günlük uygulamalar akut, 13 günlük uygulama kronik olarak kabul edildi. Kisspeptin-10, 50nmol dozunda intraperitoneal (i.p.) olarak günde 1 defa uygulandı. Kisspeptin ve GPR54'ün testis dokusundaki ekspresyonu immünfluerosan mikroskobunda incelendi. Işık mikroskopik incelemeler için Hematoksilen-Eozin, PAS (+), Masson Trikrom boyaması, proliferasyonu tanımlamak için Ki 67, apoptotik hücreleri tanımlamak için TUNEL immün boyamaları yapıldı, serumda testosteron düzeyleri ELISA ile ölçüldü. Testis dokusunun ince yapısı değerlendirildi. Kontrol grubuna göre akut dönemde testosteron seviyesi artarken, kronik uygulamada bu seviye azaldı. Spermatogenetik hürelerde Ki-67 (+) hücre sayısı kontrol grubuna göre tüm gruplarda artış göstermesine rağmen, bekletilen grupta azaldı. TUNEL yöntemi ile belirlenen apoptotik hücre sayısı, kontrol grubuna göre akut dönemde azalma gösterirken, kronik dönem uygulamalarında anlamlı olarak artmıştı. Testis ağırlığı ve tübül çaplarında anlamlı farklılık gözlenmedi. Elektron mikroskopik incelemelerde, kontrol grubunda seminifer tübül epiteli normal görünümde saptandı. Akut uygulama gruplarında (1-5) seminifer tübül epitelinde, bazal membran üzerinde apoptotik hücreler, Sertoli hücre ve spermatogonium sitoplazmasında krista yapılarında erime olan mitokondriyonlar tespit edildi. Kiss (5) grubunda, spermatik kord hücre serileri arasındaki bağlantı birimlerinde oluşan dejenerasyon sonucu spermatogenetik hücreler arasında açıklıklar görüldü. Kiss (13) grubunda ise seminifer tübül epitelinin bazal bölgesinde apoptotik hücreler gözlendi. Kiss (13+7) grubunda tübül hücreleri genellikle normal yapıda gözlenirken, bazalde yer alan bazı koyu spermatogonyumların sitoplazmasında vakuolizasyon görüldü. Tüm deney gruplarında intertisyal dokuda aktif Leydig hücreleri saptandı.Sonuç olarak, yapılan bu deneysel çalışmada kisspeptin-10'un seminifer tübüllerde akut ve kronik uygulama dönemlerinde hücre proliferasyonunu artırdığı, kisspeptinin kesilmesiyle birlikte proliferasyonun ve testosteron seviyesinin azaldığı, apoptozisin arttığı tespit edilmiştir.