Formononetin molekülünün osteoblast hücreleri üzerine etkisinin ın vitro incelenmesi

Çene cerrahisi pratiğinde çeşitli nedenlerle meydana gelen kemik dokusu kayıpları uygun greft materyalleri ile tedavi edilmektedir. Literatürde greft materyallerinin osteojenik özelliklerini ve ogmentasyonların başarısını arttırabilecek materyal ve tekniklerle ilgili araştırmaları konu alan birçok çalışma bulunmaktadır. Fitoöstrojenlerin sistemik yolla alınmasının kemik dokusunda östrojenik etki yaratarak kemiğin fiziksel ve kimyasal yapısını koruyucu etki gösterdikleri bilinmektedir. Biz de bu çalışmada fitoöstrojenler olarak bilinen bileşiklerin izoflavonlar grubuna ait olan formononetin molekülünün tek başına ya da kemik grefti varlığında osteoblast hücreleri üzerine etkisi olup olmadığını in vitro olarak incelemeyi amaçladık. Çalışmamızda insan fetal osteoblast hücreleri (hFOB1.19) greftli ya da greftsiz olarak, 1 µg/ml, 10µg/ml ve 100 µg/ml konsantrasyonlarda formononetin molekülü ile birlikte inkübe edilmiştir. Molekülün osteoblastlar üzerine etkisi 1., 6. ve 9. günde yapılan MTT ve ALP testleri ve 9. günde yapılan VEGF ve osteokalsin protein analizleri ile değerlendirilmiştir. Çalışmamızda 1 günlük inkübasyon sonucunda gruplar arasında anlamlı fark gözlenmemiştir. Osteoblast hücrelerinin sadece greft materyali ile birlikte 6 günlük inkübasyonu sonucunda hücre proliferasyonunun azaldığı, greft materyali ile birlikte formononetin varlığında ise bu durumun tersine döndüğü ve proliferasyonun doza bağlı olarak arttığı görülmüştür. Ortamda greft materyali ya da formononetin bulunduğunda ALP aktivitesinin arttığı, ikisinin birlikte bulunduğu durumlarda da ALP aktivitesinde sinerjik etki yarattıkları gözlenmiştir. 9 günlük inkübasyon sürecinin ardından Western-Blot yöntemi ile yapılan protein analizleri sonucunda en yüksek VEGF yoğunluğu greft materyali ile 100 µg/ml formononetinin birlikte bulunduğu grupta görülmüştür. Formononetinin osteoblastlardaki ALP aktivitesini ve VEGF sentezini arttırdığını gösteren bu bulgular molekülün ogmentasyon bölgesinde yeni kemik oluşumunu ve damarlanmayı arttırma potansiyeli olabileceğini göstermektedir. Anahtar Kelimeler : Formononetin, Osteoblast, Fitoöstrojen, Kemik iyileşmesi, ALP