Gentisik asit uygulamasının adipogenez sürecine etkisinin transkripsiyon faktörleri üzerinden incelenmesi

3T3-L1 öncül adiposit hücre hattı, Swiss 3T3 fare embriyolarından elde edilmektedir ve adipogenezin transkripsiyonel düzenlenmesine yönelik çalışmalarda in vitro model olarak yaygın bir şekilde kullanılmaktadır. 3T3-L1 öncül yağ hücreleri adipojenik şartlar altında olgun yağ hücrelerine farklılaşabilmektedir. Yağ hücresi farklılaşmasının inhibisyonunu araştırmak için doğal, sentetik ve yarı-sentetik birçok maddenin etkisi incelenmiş ancak bunların çok az bir kısmı yağ hücresi farklılaşmasını istenilen düzeyde inhibe edebilmiştir. Literatürde benzoik asitin adipogenezi engellediğini gösteren bir takım çalışmalar bulunmasına rağmen benzoik asitin bir türevi olan gentisik asitin adipogenez üzerindeki etkisini araştıran çalışmalar oldukça az sayıdadır. Yaptığımız çalışma, gentisik asitin, 3T3-L1 hücrelerinin farklılaşma sürecine ve transkripsiyonel faktörlerine etkisi ölçülmüştür. Çalışmamızda öncelikle 3T3-L1 öncül yağ hücreleri çeşitli maddelerle uyarılarak olgun adipositlere farklılaşması sağlanmıştır. Hücre canlılık testinde sitotoksik etki göstermeyen 50-250 μM konsantrasyonlarındaki gentisik asit çözeltileri farklılaşmaya uğratılan 3T3-L1 hücrelerine uygulanmıştır. Farklılaşmaya uğratılmayan ve farklılaşmaya uğratılıp farklı konsantrasyonlarda gentisik asit uygulanan tüm gruplarda gliseraldehit-3-fosfat dehidrogenaz (GPDH) aktivitesine, Oil Red O boyaması ile hücrelerin morfolojisine bakılmış ve hücrelerin trigliserit içerikleri spektrofotometrik olarak ölçülmüştür. Ayrıca transkripsiyon faktörlerinin (Peroksizom prolifere edici aktif reseptör-γ (PPAR-γ), CCAAT arttırıcı bağlayıcı protein-α (C/EBP-α) ve Sterol düzenleyici element bağlayıcı protein-1c (SREBP-1c)) düzeylerine bakılarak gentisik asitin adiposit farklılaşması üzerine olan etkisi incelenmiştir. Hücre içi trigliserid içerikleri doza bağlı düşüş göstermesine rağmen istatistiksel fark bulunamamıştır (p>0,05). Yapılan morfolojik incelemede artan konsantrasyonlarda gentisik asit uygulaması hücrelerin boyutunda ve hücre içi trigliserit depolanmasında sürekli bir azalmaya neden olmuştur. Özellikle yüksek konsantrasyonda gentisik asit uygulaması GPDH aktivitesinde düşüşe neden olmuştur (p<0,05). Yüksek konsantrasyonlardaki gentisik asit uygulamaları her üç transkripsiyon faktörünün düzeylerini de azaltmıştır (p<0,05). Tüm bu sonuçların doğrultusunda gentisik asitin yağ hücresi farklılaşmasını engellediğini söylemek mümkündür.