In vitro and in silico evaluation of hedera helix extract for mutagenic/antimutagenic activities and protective effects against inflammation

Hedera helix, tıbbi özellikleri yüzyıllardır bilinen, otsu çok yıllık bir bitkidir. Antibakteriyel, antifungal, antiviral, antileishmanial, antihelmintik, anti-inflamatuvar, antispazmodik, antikanser/antitümör etkilerini değerlendiren pek çok in vitro ve in vivo çalışma mevcuttur. Bu çalışmada, H. helix yapraklarının %50 EtOH ekstresinin LPS ile indüklenmiş inflamasyona karşı koruyucu etkileri yanı sıra mutajenik ve antimutajenik etkileri araştırılmış ve genotoksisite/mutajenite ve anti-inflamatuar özellikleri açısından in silico tahminler yürütülmüştür. RAW 264.7 fare makrofaj hücre kültüründe, bir mikroplak okuyucu kullanılarak stabil nitrit seviyeleri ve MTT analizi ile hücre canlılığı ölçülmüştür. Mutajenite ve antimutajenite analizleri, Ames testi ile Salmonella TA98 ve TA100 suşları üzerinde S9'lu ve S9'suz ortamda yapılmıştır. Ek olarak, H. helix yapraklarından izole edildiği bilinen bileşenlerin in silico analizini yapmak amacıyla, Danish (Q)SAR veritabanı, pkCSM web sunucusu, OCHEM web platformu, ProTox-II web hizmeti, T.E.S.T. yazılımı, PASS online yazılımı ve VEGA (Q)SAR platformu olmak üzere 7 farklı platform kullanılmıştır. H. helix ekstresi, test edilen suşların hiçbirinde mutajenik etki göstermemiştir. In silico platformlarda yapılan tahminler, Ames testi ve diğer in vivo/in vitro genotoksisite/kanser sonlanım noktalarında negatif tahminler vererek bu bulgumuzu desteklemiştir. Güçlü antimutajenik etki, yalnızca 5000 µg/plak konsantrasyonunda gözlenmiştir. H. helix ekstresi, konsantrasyona bağlı olarak indometazin ve L-NAME ile benzer etki göstermiştir. Anti-inflamatuar aktiviteye dair tahminler, H. helix yapraklarından izole edilmiş 36 bileşen için pozitif bulunmuştur. Bununla beraber, nitrik oksit antagonisti, nitrit redüktaz (NO-yapıcı) inhibitörü ve nitrik oksit sentaz inhibitörü gibi aktiviteler için pozitif tahmin sayısının az olduğu görülmüştür. Bu bulgular, H. helix yaprak ekstresinin anti-inflamatuar etkisinin, yalnızca NO inhibisyonuna bağlı olmadığını göstermiştir. Bu aktiviteye katkı sağlayan diğer anti-inflamatuvar mekanizmaların keşfedilmesi için ileri çalışmalar yapılabilir.