PINK1-AS lncrna'sının HCT 116 kolon kanseri hücre hattındaki etkisinin araştırılması

Kanser, kalp ve damar hastalıklarından sonra dünyada görülme sıklığı en çok olan hastalıktır. Kolon kanseri dünyada en çok görülen 3. kanser türüdür. Tüm yaşlarda görülmesine rağmen % 90'nından fazlası kırk yaş ve üzerindedir. Kanser tedavisine yönelik kullanılan kemoterapik ilaçlar kanserin ilerlemesini durdurmak ve tümörü yok etmeyi amaçlamaktadır. Kullanılan bu ilaçlar tümörlü hücrelerin yok olmasını sağlarken sağlıklı hücrelerin zarar görmesine sebep olmaktadır. Yeni tedavi yöntemi olarak, hücrelerin kanserleşmesine sebep olan moleküllerin ifade seviyelerinin düzenlenmesine yönelik çalışmalar hız kazanmıştır. Tüm kanser türlerinde olduğu gibi kolon kanserinin de oluşmasında çevresel faktörlerin yanı sıra kodlamayan RNA'larında etkisi olduğu yapılan çalışmalar ile tespit edilmiştir. Kolon kanserinde PINK1 genin aşırı ifade olması ve kanserleşme sürecinde etkisi olduğu bulunmuştur.PINK1-AS geni, PINK1 geninin zıttı olup bu genin ifade sırasında düzenlenmesinde sorumlu bir uzun kodlamayan RNA'dır. İlişkilendirilmiş anti-miRNA'larla PINK1-AS genini hedefleyerek PINK1 geninin ifadesini düzenleyip kolon kanseri hücrelerinde programlı ölüm yolağının tetiklenmesini sağlamayı düşünmekteyiz. Bu amaçla kolon kanseri hücre hattına (HCT116) kültür ortamında PINK1-AS'i hedefleyen anti-miRNA'lar aktarıldı. Bu hücrelerden total RNA elde edilip, cDNA sentezi yapıldı. Eş zamanlı PCR kullanılarak PINK1-AS, PINK1 ve PTEN gen ifade düzeylerine bakıldı. miRNA aktarımı yapılan HCT116 hücre soyunun apoptozis düzeyini belirlemek için akım sitometri kullanıldı. Yapılan çalışmada elde edilen bulgulara göre, ilişkilendirilmiş miRNA'lara maruz bırakılan hücrelerde PINK1-AS, PINK1 ve PTEN gen ifade seviyelerinde negatif kontrol miRNA'a göre anlamlı bir değişim gözlenmemiştir. Programlı ölüme giden hücre sayısıyla canlı hücre sayısı oranları kıyaslandığında anlamlı bir değişim gözlenmemiştir. Sonuç olarak; PINK gen ifadesinin susturulması için PINK1-AS genini hedefleyen farklı moleküller tespit edilerek, kolon kanserinde tedaviye yönelik yeni çalışmalar yapılabilir.