Panton valentine lökosidin (PVL) toksininin rekombinant üretimi ve prostat kanseri hücre hattı üzerine etkisinin araştırılması

Amaç: Bu çalışmanın amacı sitotoksik etkisi olan Panton-Valentine lökosidini (PVL) rekombinant olarak üretmek ve prostat kanser hücre hattı üzerinde etkisini incelemektir. Gereç ve Yöntem: Rekombinant DNA teknolojisi kullanılarak NCBI (CP084892) tüm genom sekans dizisine göre PVL, LukS-PV ve LukF-PV gen bölgelerini içeren primerler tasarlandı ve çoğaltılan genler pET30a(+) ekpresyon vektörüne klonlandı. Sekans analizi ile doğrulanan klonlar rekombinant protein eldesi için kullanıldı. Sentezlenen proteinler saflaştırılarak makrofaj üzerindeki etkisi araştırıldı. Daha sonra normal prostat hücre hattı (RWP-1) ve prostat adenokarsinom hücre hattı (PC3) üzerindeki sitotoksik etkisi WST-1 testi ile ölçüm yapılarak sonuçlar değerlendirildi. Bulgular: Rekombinant LukS-PV ve LukF-PV tek başlarına ve birlikte elde edildi. Daha sonra elde edilen proteinlerin makrofaj üzerinde etkisine bakıldığında rPVL ve LukS-PV'nın etkili olduğu ancak LukF-PV'nın etkisi olmadığı görüldü. Aynı şekilde prostat normal hücre hattına (RWP-1) ve adenokarsinom hücre hattına (PC3) uygulandığında, elde edilen rekombinant ürünlerin iki hücre hattına da etkisinin olmadığı görüldü. Sonuç: Panton Valentine Lökosidin'nin makrofaj hücre hattına sitotoksik etkisi varken prostat normal hücre hattı (RWP-1) ve adenokarsinom hücre hattı (PC3) üzerinde etkisi saptanamamıştır.