Bademcik hastalarından izole edilen streptokinaz genotipine ilişkin Streptokokkus pyogenleri arasındaki streptokinaz aktivitesinin moleküler tanımı ve değerlendirilmesi

Bademcik iltihabı olan bir hastadan yaklaşık 100 boğaz sürüntü örneği alındı ve bunlardan 60 tanesi biyokimyasal testlerle elde edildi. Bu 60 kişiden 40'ı hemolitik, altısı da S.piyojenik olarak tanımlandı. Bu altı suşun streptokinaz üretme yeteneği değerlendirildi. Altı suş arasında en değişken üretim derecesine sahip olanı S.pyogens S30 idi. Aktivitesi 0.35 U/mg idi. S.pyogens S30, streptokinaz üretimi için optimal koşulları belirlemek üzere seçildi. Enzimin maksimum miktarı, suşa %0.5 glukoz, %1.5 maya özütü ve 10 4 büyüklüğünde bir inokulum içeren bir baz ortamı verildikten sonra elde edildi. Streptokinaz üretimi için optimal koşullar, çöktürme ile belirlendi. %45 amonyum sülfat doygunluğu. Elde edilen enzim daha sonra iyon değişimi, jel filtrasyonu ve DEAE-Selüloz kombinasyonu kullanılarak saflaştırıldı. Son adımdan sonra enzimin spesifik aktivitesi 54 U/mg'ye yükseltildi. Daha sonra, S.pyogens pyogenes'e özgü primerin varlığını belirlemek için bir PCR yöntemi kullanılarak analiz edildi. Sonuçlar, altı üretim suşunun %100 pozitif bantlar sergilediğini gösterdi.