Pepsin immobilize edilmiş kriyojel biyoreaktörlerin hazırlanması

Kriyojeller üç boyutlu polimerik iskelet yapıya sahip, birbirine gözenekli ağlar ile bağlı, iletim yolu ile taşınıma izin veren destek malzemeleridir ve çeşitli biyoayırma işlemlerinde uygulanacak yeni ayırma matriksleri olarak geliştirilmiştir. Kriyojeller son yıllarda terapötik proteinlerin üretimi ve degredasyonu için biyoreaktör olarak da kullanılmaktadır. Biyoreaktörlerin sağlık sektöründe teşhis, tedavi amaçlı ve biyofarmasötik üretiminde tek kullanımlık olarak kullanılması mevcuttur. Ancak biyoreaktörlerin tek kullanımlık olması maliyeti önemli ölçüde arttırırken, tekrarlanabilirliliği azaltmaktadır. Biyofarmasötik uygulamalarda proteinlerin tamamı yerine proteinlerin istenilen parçalanma ürünlerini kullanmak hedefe yönelik bir yaklaşımdır. Böylece spesifik olmayan etkileşimlerden kaynaklanan kontaminasyonların önüne geçilmiş olunacaktır. F(ab´)2 fragmanları immünoglobulin G (IgG) molekülünün antijen-antikor etkileşimlerinde kullanılan bölgesidir. Ticari olarak satılan terapötik monoklonal F(ab´)2 fragmanları sağlık sektöründe oldukça önemlidir. Sunulan çalışmada, sürekli sistemde çalışılmış ve aynı zamanda pepsin enziminin immobilizasyonu kolay ve etkili bir kriyojel biyoreaktörün yapıldığı ileri sürülmüştür. Kriyojel biyoreaktör kullanılarak Pepsin immobilizasyonunun etkili ve güvenilir dizaynı için, matriksin epoksi grupları ve Pepsin enziminin amino grupları arasında kovalent immobilizasyon yapılmıştır. Enzim immobilize edilmiş kriyojel bioreaktör SEM ve şişme testiyle karakterize edilmiştir. İmmobilize edilmiş pepsin geniş pH aralıklarındaki spesifik aktivitesi, substrat konsantrasyonu, sıcaklık ve depo kararlılığı, IgG susbstrat olarak kullanıldığı bir çözeltideki serbest pepsin ile kıyaslanmıştır.