Timokinon'un OVCAR-3 insan ovarian adenokarsinom hücrelerinde EGFR/FOXP3 sinyal yolağına etkisinin araştırılması

Amaç: Çalışmamızda, OVCAR3 insan ovarian adenokarsinom hücreleri ile insan deri keratinosit hücre serisi HaCat hücrelerinde kemoterapötik ilaç olan doxorubicin (Dox) ve doğal antikanser özelliği olan timokinon (TQ) uygulanarak sitotoksik etkilerinin araştırılması amaçlandı. Kanser, artan bir hızla insan yaşamını tehdit eden bir hastalık haline gelmiştir. Çalışmamızda kullandığımız Nigella sativa L. (çörek otu) bitkisinin aktif bileşenlerinden biri olan TQ'nun ovarian kanseri üzerine sitotoksik etkisi hakkındaki çalışmalar sınırlıdır. Bu nedenle önemli bir sorun olan over kanseri tedavisi için alternatif ve kemoterapiye destek sağlayabilecek potansiyeli olan TQ'nun sitotoksisitesi EGFR/FOXP3 yolağı üzerinden araştırıldı. Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda, Timokinon ve Doxorubicin'in farklı dozları hücrelere 24, 48 ve 72 saat süreyle uygulanarak MTT yöntemi ile sitotoksisite düzeyi belirlendi. Western blot ve RT-PCR analizi ile metastaz belirteçlerinden EGFR ve FOXP3 ile apoptoz belirteci API5 genlerine ve ekspresyon düzeylerine bakıldı. DAPI boyaması sonrası koloni sayımı yapılarak hücre proliferasyonuna olan etkisi saptandı. Metastaz için in vitro yara modeli oluşturularak uygulamalar gerçekleştirildi ve hücre göçü morfolojik olarak değerlendirildi. Tüm sonuçlar istatiksel olarak analiz edildi. Bulgular: MTT ile sitotoksisitenin TQ ve Dox uygulanan grupta en yüksek seviyede gerçekleştiği, metastazın özellikle TQ ve Dox komibne uygulanan grupta engellendiği, RT-PCR analizi ile EGFR ve FOXP3 yolağındaki aktivitenin TK ile en fazla düştüğü yine protein miktarının TQ ve Dox ile azaldığı bulundu. Sonuç: Çalışma sonucunda TK uygulanması ile en yüksek sitotoksik etkinin, en yüksek apoptoz indüksiyonunun gerçekleştiği, EGFR ve FOXP3 düzeylerinde anlamlı düşüşün ise TK ve Dox uygulamalarında meydana geldiği gösterildi. Anahtar Sözcükler: OVCAR3, Timokinon, EGFR, FOXP3, Apoptoz, Metastaz.