Yem katkısı olarak kullanılan enzimleri üreten yeni bakteri suşlarının izolasyonu, mutasyonu ve enzim üretimindeki etkinliklerinin saptanması

Bu çalışma ile alkalifilik, halofilik ve termofilik Bacillus sp suşları V-41 (amilaz+), KH-13 (amilaz+, ksilanaz+) ve CU-48 (amilaz+, CMCaz+) izole edilmiş ve kısmi karakterizasyonları yapılmıştır. İzolatların türlerinin tanımlanması 16S rRNA dizi analizi ile yapılmıştır. Her üç izolat da Ethidium Bromid (EtBr) ile mutasyona uğratılmış ve üçünden de dörder adet mutant varyete elde edilmiştir. V-41 suşundan elde edilen V41-M4 mutant varyetesinde -amilaz aktivitesinin orijinal suşa göre %90.9 oranında daha yüksek olduğu görülmüştür. KH-13 izolatından elde edilen KH13-M3 mutant varyetesinin %15.74 oranında daha yüksek -amilaz, KH13-M4 mutant varyetesinin ise %35.08 oranında daha yüksek ksilanaz aktivitesi olduğu görülmüştür. CU-48 izolatından elde edilen CU48-M2 mutant varyetesi ise orjinal bakteriye göre %101.32 oranında daha fazla ?-amilaz aktivitesi göstermiştir. Zimogram analizleri ile enzimlerin moleküler ağırlıkları; V-41 -amilaz için 70 kDa, KH-13 -amilaz ve ksilanazı için 66 ve CU-48 -amilaz için 45 kDa olarak belirlenmiştir. Enzimlerin spesifik aktiviteleri araştırılmış ve V41-M4 -amilazı için 1.27 µmol mg-1 dk-1, KH-13 ?-amilaz ve ksilanazı için sırasıyla 5.35 ve 2.58 µmol mg-1 dk-1, ve son olarak CU-48 -amilaz ve CMCazı için sırasıyla 4.4 ve 1.30 µmol mg-1 dk-1 olarak belirlenmiştir. Son olarak enzimlerin kısmi karakterizasyonları da yapılmış ve zamana göre enzim aktiviteleri de belirlenmiştir.