In vitro regeneration and analysis of phenolics in Digitalis ferruginea L. subsp. schischkinii (Ivan.) werner

Digitalis ferruginea L. subsp. schischkinii (Ivan.) Werner'in kotiledon yaprağı ve hipokotil eksplantlarından etkili bir in vitro çoğaltım protokolü geli?tirilmi?tir. Sterilizasyondan sonra tohumlar çimlendirme ortamına alınmı? ve daha sonra çimlenen fidelerden eksplantlar izole edilerek, farklı bitki büyüme düzenleyicileri içeren MS ortamlarında (TDZ, BA, KIN, TDZ+IAA, BA+IAA, KIN+IAA, TDZ+IAA+GA3) kültüre alınmı?tır. En iyi sürgün olu?umu 2.0 mg/l TDZ ile 0.5 mg/l IAA içeren ortamdaki hipokotil eksplantından elde edilmi? ve eksplant ba?ına ortalama 11.0 sürgün olu?umu gözlemlenmi?tir. TDZ ve IAA'nın aynı konsantrasyonuna 0.5 mg/l GA3 eklendiğinde ise sürgün olu?umu eksplant ba?ına 6.5 sürgün vererek azalmı?tır. 1.0 mg/l BA ile 0.5 mg/l IAA içeren ortamda, hipokotil explantı ba?ına ortalama 6.16 sürgün elde edilmi?tir. Sürgün olu?umu için KIN ve IAA kombinasyonları uygulanmı? ve 2.0 mg/l KIN ve 0.5 mg/l IAA ortamı hipokotil explantı için ortalama 7.0 sürgün vermi?tir.Sonuç olarak, hipokotil eksplantı sürgün verimliliği açısından uygulanan bitki büyüme düzenleyicilerinde kotiledon yaprağı eksplantına göre daha etkili olmu?tur. Sürgün olu?umunu artırmada en etkili bitki büyüme düzenleyicisi TDZ ve IAA kombinasyonu olmu?tur. BA ve KIN'in oksinlerle kombinasyonunda TDZ kadar etkin olmamasına rağmen bu kombinasyonları içeren ortamlarda da sürgün, kallus ve kök olu?umu gözlemlenmi?tir. Ortamlardan elde edilen sağlıklı sürgünler oksin içeren ortamlara kök olu?umu için aktarılmı?tır. Sürgünlerde hızlı bir ?ekilde kök eldesi için en etkili oksin IAA olmu?tur. Köklenen sürgünler plastik saksılara aktarılmı? ve iklimlendirme i?lemi yapılarak, bitkilerin %70'nin hayatta kalması sağlanmı?tır.Toplam fenolik miktarı analizlerini içeren çalı?manın son bölümünde ise, köklenen sürgünler kurutularak, örnekler absorbans değerlerine göre UV-spectrofotometrede analiz edilmi?tir. Sonuçlar toplam fenolik miktarının farklı örnekler arasında önemli bir deği?iklik göstermediğini ortaya koymu?tur. TDZ ve IAA kombinasyonları arasında en yüksek toplam fenolik miktarı 0.2 mg/l TDZ'nin 1.0 mg/l IAA ile kombinasyonunda 1149.7 ?g/g dw olurken, KIN ve IAA kombinasyonları için en yüksek toplam fenolik değeri 0.5 mg/l KIN'in 1.0 mg/l IAA ile kombinasyonunda 1205.8 ?g/g dw olarak bulunmu?tur.