Gıdalarda faj terapi yöntemi ile lactococcus garvıeae inhibisyonunda kullanılabilecek fajların izolasyonu ve karakterizasyonu

Lactococcus garvieae, insan, hayvan ve balıklarda çeşitli bulaşıcı hastalıklara neden olan bir balık patojenidir. Özellikle su ürünleri yetiştiriciliğinde önemli ekonomik kayıplara neden olan bu bakteri tatlı su, deniz suyu, toprak ve bitki yüzeyleri gibi ortamlarda bulunmaktadır. Gıdalarda patojenlerin inhibisyonun sağlanması için çeşitli yöntemler (ısıl işlem, kimyasallar gibi) kullanılsa da bu yöntemlerin dezavantajları mevcuttur. Bu yöntemlerin aksine, son yıllarda patojenlerin ortadan kaldırılması için umut verici antimikrobiyal ajanlar olarak görülen bakteriyofajların birçok avantajı vardır. Bu çalışmada, L. garvieae'e özgü litik bakteriyofajlardan oluşan bir faj kokteylinin su örneği üzerindeki etkinliği değerlendirilmiştir. Bu amaçla, Bolu ilinin farklı bölgelerinden toplanan 24 adet çiğ inek sütü ve 1 adet kanalizasyon suyu örneğinden L. garvieae etkili 29 adet faj izole edilmiştir. İzole edilen bu fajlar saflaştırılıp titreleri 108 PFU/mL'ye ulaştıktan sonra DNA'ları izole edilmiş ve RFLP profilleri belirlenmiştir. Restriksiyon profillerine göre 3 gruba ayrılan fajlardan titresi en yüksek olan 12S4-2, 15S3-2 ve 15S21-2 fajları seçilerek karakterize edilmiştir. Bu fajların karakterizasyonu için enfeksiyon çoklukları, adsorpsiyon hızları, konakçı aralıkları, latent dönemleri ve patlama boyutları belirlenmiştir. Karakterize edilen 12S4-2, 15S3-2 ve 15S21-2 fajlarından bir faj kokteyli hazırlanmış ve su örneğinde L. garvieae üzerindeki etkinliği belirlenmiştir. Elde edilen sonuçlar, faj kokteylinin MOI (Multiplicity of Infection): 0,1 ve MOI: 10 değerlerinde L. garvieae suşlarını tamamen ortadan kaldırdığını göstermiştir. Bu sonuç, faj kokteylinin L. garvieae'nin su örneğindeki varlığını etkin bir şekilde azalttığını ve potansiyel olarak patojenin kontrolünde kullanılabileceğini göstermektedir.