Morusinin insan fibroblast hücre hattında matriks metaloproteinaz-1 üzerine etkisinin ın-vitro araştırılması

Amaç: Morusinin insan fibroblast Hs68 hücre hattında, MMP-1 üzerine etkisi in-vitro olarak araştırmaktır. Yöntem: Hs68 hücreleri çoğaltılıp Tripsin-EDTA ile kaldırılarak 96 kuyucuklu plaklara bölünmüştür. 24 saatlik inkübasyon süresi sonunda morusin 32- 0,015625 μM/mL konsantrasyon aralığındaki dozlar hücrelere uygulanmıştır. 24, 48 ve 72 saatlik inkübasyonları sonunda hücre proliferasyonu üzerine etkileri WST-1 kiti ile çalışılmıştır. Çoğaltılan hücreler bu sefer 6 kuyucuklu plaklara bölünmüştür. 24 saatlik inkübasyon süresi sonunda morusin 4 - 0,5 μM/mL konsantrasyon aralığındaki dozlar hücrelere uygulanmıştır. 24, 48 ve 72 saatlik inkübasyon süreleri sonunda MMP-1 salınımına etkisi MMP-1 kiti ile çalışılmış ve absorbans değerleri ELISA okuyucuyla alınmıştır. Bulgular: Morusin'in Hs68 hücre hattına uygulanan 32, 16 ve 8 μM/mL konsantrasyonları hücrelerin tamamına yakınını öldürdüğü görülmüştür. 4 ve 2 μM/mL konsantrasyonlarında anlamlı bir sitotoksik etki, 1 ve 0,5 μM/mL konsantrasyonlarda daha az sitotoksik etki gösterdiği belirlenmiştir. MMP-1 miktarı, uygulanan morusin konsatrasyonuna bağlı olarak 24 saat inkübasyon süresi sonunda 4 μM/mL'de %1,64 ve 0.5 μM/mL'de %1,72 artmış; 2 μM/mL'de %2,80 ve 1 μM/mL'de %8,70 azalmıştır. MMP-1 miktarı 48 saat sonra 4 μM/mL'de %1,90; 2 μM/mL'de %11,90 ve 0.5 μM/mL'de %4,12 azalmış, 1 μM/mL'de ise %1,67 artmıştır. MMP-1 miktarı 72 saat sonra 4 μM/mL'de %10,64; 2 μM/mL'de %8,26; 1 μM/mL'de %21,78 ve 0.5 μM/mL'de ise %12,80 artmıştır. Sonuç: Morusinin uygulanan konsantrasyonları Hs68 hücreleri için sitotoksik ve hücre proliferasyonunu azaltıcı özellik göstermiştir. Kullanılan morusinin zamana bağlı olarak sadece 2 konsantrasyonu MMP-1 miktarını azaltması, hücreler için yaşlanma karşıtı bir sonuç ortaya koyarken diğer konsantrasyonlarının yaşlanmayı hızlandırıcı bir etki gösterdiği görülmüştür.