Musa textilis (muz) kabuğu kullanarak katı-faz fermantasyon tekniği ile (SSF) Bancillus sp.'de a-amilaz üretimi

Günümüzde, biyoteknolojide enzimlerin kullanımı giderek önem kazanmaktadır. Bu enzimlerden biri olan a-amilaz, önemli biyoteknolojik enzimler arasındadır, a - amilazlar, nişastanın hidrolizi için gıda, deterjan, tekstil, kağıt, bira ve alkol gibi endüstriyel alanlarda kullanılmaktadır. Muz, karpuz ve kavun kabuğu, buğday ve mercimek kepeği ve darı gibi farklı SSF kaynaklan topraktan izole edilen Bacillus sp. tarafından substrat olarak kullanılarak a - amilaz aktivite oranları test edilmiştir. Enzim üretimi açısından en fazla olandan en az olana doğru muz kabuğu > karpuz kabuğu > mercimek kepeği > buğday kepeği > kavun kabuğu > darı olduğu tespit edilmiştir. Muz kabuğu üzerinde en yüksek aktivite görüldüğünden daha sonraki çalışmalarda muz kabuğu substrat olarak kullamldı. SSF metoduyla Bacillus sp. muz kabuğunu substrat olarak kullanarak değişik inkübasyon sürelerinde a - amilaz aktivitesi ölçülmüştür. İnkübasyon süresi 72. saat olarak uygun bulunmuştur. SSF metoduyla Bacillus sp. muz kabuğunu substrat olarak kullanarak % 2'lik karbon kaynağı eldentisinin a - amilaz aktivitesi üzerine etkisine bakılmıştır. En yüksek aktivitenin nişasta en düşük aktivitenin ise glukoz ile olduğu tespit edilmiştir. Sukroz enzim aktivitesini etkilememiştir. Mannoz, galaktoz, arabinoz ve glukoz kontrolden düşük çıkmıştır. SSF metoduyla Bacillus sp. muz kabuğunu substrat olarak kullanarak % 10'luk azot kaynakları elentisinin a - amilaz aktivitesi üzerindeki etkisine bakılmıştır. Amonyum sülfat, bacto casamino acid, bacto liver ve metWonin kontrolden yüksek çıkmıştır. NH4CI ve NH4N03 kontrolden düşük çıkmıştır. Ürede enzim aktivitesi görülmemiştir. En yüksek aktivitenin amonyum sülfat'ta olduğu tespit edilmiştir. NB besiyerinde üretilen bakterinin süpernatantında a-amilaz enziminin bazı özellikleri incelenmiştir. pH 4-11 arasında a - amilaz aktivite tayini yapıldı. Optimum pH 6 olarak belirlendi. 25 °C ile 95 °C arasında a - amilaz aktivite tayini yapıldı. Optimum sıcaklık 60 °C olarak belirlendi. 60 °C'de zamana bağlı enzim stabilite ölçümü için 30 ile 240 dakika arasında a - amilaz aktivite tayini yapıldı. 15-90 dakikaya kadar enzim aktivitesinde bir artış gözlendi.Sonra 90- 240 dakika arasında enzim aktivitesinde bir azalış görüldü. Bununla birlikte 240 dakika sonunda enzim aktivitesinde bir değişmenin olmadığı tespit edildi. NB besi yerinin üst sıvısında, % 2'lik deterjanların (SDS, CHAPS, omo matik) enzim aktivitesi üzerine olan etkisi zamana bağlı olarak 15 ile 90 dakikalık zaman aralığında test edilmiş, inhibisyon etkisi en fazla olandan en aza doğru SDS > Omo Matik > CHAPS şeklinde olduğu tespit edilmiştir.