Theses supervised by Doç. Dr. Metin Bülbül
13 theses · Kütahya Dumlupınar University
Tiyadiazol türevleri bileşiklerin karbonik anhidraz inhibitörü olarak insan karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkilerinin araştırılması
Karbonik anhidraz (EC. 4. 2. 1. 1), CO2'in, HCO3- ve H+ iyonlarına iki basamakta dönüşümlü hidratasyonunu katalizleyen, çinko iyonlu metaloenzimlerden biridir. İnsan gözünde CA-I, CA-II ve CA-IV izoenzimleri bulunur. Karbonik anhidraz inhibitörleri, aköz humorun salgılanmasıyla oluşan yüksek göz içi basıncın (IOP) düşürdükleri için, glokom hastalığı tedavisinde etkili olarak kullanılırlar.Bu çalışmada glokom hastalığı tedavisinde kullanılmaya aday yeni karbonik anhidraz (CA) inhibitörlerinin, karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri araştırılmıştır.Önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz enzimleri afinite jeli kullanılarak (Sepharose-4B-L-tirozin-sülfonilamid) saflaştırılmış ve daha sonra bu enzimlerle kinetik çalışmalar yapılmıştır.Daha sonra sentezlenen yeni bileşiklerin (1, 2, 3) insan eritrosit HCA enzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanıldı. HCA'nın hidrataz ve esteraz aktivitesi üzerinde 1, 2, 3 no'lu bileşiklerin inhibisyon etkisi gösterdiği belirlenmiştir. İnhibisyon etkisi gösteren ilaçlar için % aktivite-[I] grafikleri çizilerek I50 değerleri bulunmuştur. CO2-Hidrataz aktivitesine göre inhibisyon gösteren 1, 2 ve 3 bileşiklerinin I50 değerleri (enzimli reaksiyon süresini yarıya düşüren inhibitör konsantrasyonu); HCA I için 0,080 ile 0,800 ? M ve HCA II için 0,053 ile 0,480 ? M arasında bulundu. Esteraz aktivitesine göre ise; HCA I için 0,097 ? M ile 3,798 ? M arasında HCA II için 0,046 ? M ile 0,361 ? M I50 değerleri bulundu.Anahtar Kelimeler: Glokom, I50 Değerleri, Karbonik Anhidraz, Sülfonamidler
5-amino-1, 3, 4-tiyadiazol türevlerinin insan karbonik anhidraz izoenzimleri üzerinde inhibisyon etkilerinin incelenmesi
Bu çalışmada glokom hastalığı tedavisinde kullanılmaya aday yeni karbonik anhidraz (CA) inhibitörlerinin, karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri araştırılmıştır.Bu amaçla önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz izoenzimleri (HCA-I, HCA-II) afinite kromatografisi ile ayrı ayrı saflaştırıldı.Daha sonra sentezlenen yeni bileşiklerin (11, 12, 13) insan eritrosit HCA enzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanıldı. HCA'nın hidrataz ve esteraz aktivitesi üzerinde 11, 12, 13 no'lu bileşiklerin inhibisyon etkisi gösterdiği belirlenmiştir. İnhibisyon etkisi gösteren ilaçlar için % aktivite-[I] grafikleri çizilerek I50 değerleri bulunmuştur. CO2-Hidrataz aktivitesine göre inhibisyon gösteren 11, 12 ve 13 bileşiklerinin I50 değerleri (enzimli reaksiyon süresini yarıya düşüren inhibitör konsantrasyonu); HCA-II için 0,8.10-7 ile 1,09.10-7 M arasında bulundu. p-Nitrofenil asetatı hidroliz aktivitesi olan esteraz aktivitesine göre ise; HCA-II için 1,0.10-7 ile 3,2.10-7 M arasında I50 değerleri bulundu.
Mantar bileşenlerinin karbonik anhidraz inhibitörü olarak insan karbonik anhidraz enzimleri üzerinde inhibisyon etkilerinin incelenmesi
Karbonik anhidraz (EC.4.2.1.1), ilk defa memelilerin eritrositlerinden saflaştırılan, çinko iyonlu bir metaloenzimdir. Karbonik anhidraz CO2'in, HCO3- ve H+ iyonlarına iki basamakta dönüşümlü hidratasyonunu katalizler. İnsan gözünde CA-II ve CA-IV izoenzimleri bulunur. Karbonik anhidraz inhibitörleri, aköz humorun salgılanmasıyla oluşan yüksek göz içi basıncını (IOP) düşürdükleri için, glokom hastalığının tedavisinde etkili olarak kullanılırlar.Yapılan araştırmalarda mantarların kan şekerini ve kolesterolü düşürücü, antioksidan, antitumör ve göz hastalıklarını tedavi edici etkiye sahip olduğu görülmüştür. Çalışmamızda en çok kullanılan tıbbi mantarların önemli bileşenleri olan beta D- glukan, lektin, linoleik asit ve beta karotenin karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri incelenmiştir.Önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz enzimleri afinite jeli kullanılarak (Sepharose-4B-L-tirozin-sülfonilamid) saflaştırılmış ve daha sonra bu enzimlerle kinetik çalışmalar yapılmıştır. Temin edilen beta D- glukan, lektin, linoleik asit ve beta karotenin insan eritrosit HCA I ve HCA II enzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelenmiştir. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanılmıştır. HCA'nın esteraz aktivitesi üzerinde lektin, linoleik asit ve beta karoten bileşiklerinin inhibisyon etkisi, beta D- glukanın ise aktivasyon etkisi belirlenmiştir. İnhibisyon etkisi gösteren maddeler için % aktivite-[I] grafikleri çizilerek I50 değerleri bulunmuştur. CO2-Hidrataz aktivitesine göre inhibisyon gösteren lektin ve linoleik asit bileşiklerinin I50 değerleri; HCA I için 2,41 ve 2,3 ? M ve HCA II için 2,52 ve 1,48 ? M arasında bulundu. Esteraz aktivitesine göre ise; HCA I için 4,9, 0,17 ve 1,45 ? M ile HCA II için 2,7, 1,2 ve 0,92 ? M I50 değerleri bulundu.
Yeni proton transfer bileşiklerinin antiglokom aktivitesinin incelenmesi
Bu çalışmada karbonik anhidraz izoenzimlerinin insan eritrositlerinden saflaştırılması ve daha önce sentezlenen bileşiklerin; glokom tedavisinde rolü olan HCA I ve HCA II enzimleri üzerinde inhibisyon etkilerinin in vitro olarak incelenmesi amaçlanmıştır.Önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz enzimleri afinite jeli kullanılarak (Sepharose-4B-L-tirozin-sülfonilamid) saflaştırılmış ve daha sonra bu enzimlerle kinetik çalışmalar yapılmıştır.Daha sonra Hsba ve serbest ligandlardan (en ve amp) sentezlenen yeni bileşiklerin (1 ve 2) insan eritrosit CA izoenzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanıldı. HCA'nın hidrataz ve esteraz aktivitesi üzerinde Hsba, 1 ve 2 no'lu bileşiklerin inhibisyon etkisi gösterdiği belirlenmiştir. İnhibisyon etkisi gösteren ilaçlar için %aktivite-[I] grafikleri çizilerek I50 değerleri bulunmuştur. CO2-Hidrataz aktivitesine göre inhibisyon gösteren Hsba, 1 ve 2 bileşiklerinin I50 değerleri (enzimli reaksiyon süresini yarıya düşüren inhibitör konsantrasyonu); HCA I için sırasıyla 0.45 ? M , 0.15 ? M ve 0.32 ? M ve HCA II için 0.40 ? M, 0.06 ? M ve 0.15 ? M bulundu. Esteraz aktivitesine göre ise; HCA I için sırasıyla 3.2 ? M, 0.13 ? M ve 0.8 ? M, HCA II için 18 ? M,0.14 ? M ve 0.1 ? M I50 değerleri bulundu.
Sülfobenzoik asit türevlerinin antiglokom etkisinin karbonik anhidraz enzimleri üzerinde incelenmesi
Karbonik anhidraz (E.C. 4. 2. 1. 1), merkezinde Zn+2 bulunan bir metaloenzimdir. Omurgalılarda CO2, bu enzimin substratıdır. Hücreler ve hücreler arası sıvıda CO2 ve H2CO3 dönüşümlerini katalizler. İnsan gözünde CA-II ve CA-IV izoenzimleri bulunur. CA-II izoenzimi glokom hastalığı tedavisinde kullanılmasından dolayı önemli bir enzimdir.Bu çalışmada yeni bileşiklerin karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri araştırılmıştır.Bu amaçla önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz izoenzimleri (CA-I, CA-II) afinite kromatografisi ile ayrı ayrı saflaştırıldı.Daha sonra sentezlenen yeni bileşiklerin (1 ve 2) insan eritrosit CA enzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanıldı. İnsan eritrosit CA'nın hidrataz ve esteraz aktivitesi üzerinde 1, 2 no'lu bileşiklerin inhibisyon etkisi gösterdiği belirlenmiştir. İnhibisyon etkisi gösteren ilaçlar için % aktivite-[I] grafikleri çizilerek I50 değerleri bulunmuştur. CO2-Hidrataz aktivitesine göre inhibisyon gösteren 1 ve 2 bileşiklerinin I50 değerleri (enzim aktivitesini yarıya düşüren inhibitör konsantrasyonu); insan eritrosit CA I için 0,26 ile 0,13 ? M ve insan eritrosit CA II için 0,30 ile 0,15 ? M arasında bulundu. Esteraz aktivitesine göre ise; insan eritrosit CA I için 0,32 ? M ile 0,045 ? M arasında insan eritrosit CA II için 0,29 ? M ile 0,23 ? M I50 değerleri bulundu.
Bazı mantar homojenatlarının karbonik anhidraz izoenzimleri üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi
Karbonik anhidraz (EC.4.2.1.1), ilk defa memelilerin eritrositlerinden saflaştırılarak elde edilen, çinko iyonlu bir metaloenzimdir. Karbonik anhidraz iki basamakta CO2'in, HCO3- ve H+ iyonlarına dönüşümlü hidratasyon reaksiyonunu katalizler. İnsan gözünde CA-II ve CA-IV izoenzimleri bulunur. Karbonik anhidraz inhibitörleri, aköz humorun salgılanmasıyla oluşan yüksek göz içi basıncını (IOP) düşürdükleri için, glokom hastalığının tedavisinde etkili olarak kullanılırlar.Yapılan araştırmalarda mantarların kan şekerini ve kolesterolü düşürücü, antioksidan, antitumör ve göz hastalıklarını tedavi edici etkiye sahip olduğu görülmüştür. Bu çalışmada Lentula Edodes, Lactarius Deliciosus, Lactarius Deterrimus, Terfezia Boudieri Chatin mantarlarının karbonik anhidraz enzimi üzerindeki inhibisyon etkileri incelenmiştir.Önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz enzimleri afinite jeli kullanılarak (Sepharose-4B-L-tirozin-sülfonilamid) saflaştırılmış ve daha sonra bu enzimlerle kinetik çalışmalar yapılmıştır. Temin edilen mantar homojenatlarının insan eritrositlerindeki HCA I ve HCA II enzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelenmiştir. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanılmıştır.Mantar homojenatlarının insan eritrositlerdeki HCA-I ve HCA-II enzimlerinin hidrataz ve esteraz aktiviteleri üzerindeki inhibisyon etkileri araştırıldıktan sonra % Aktivite-[I] grafikleri çizildi.Anahtar Kelimeler: Glokom, Karbonik Anhidraz İnhibitörleri, Lentinula Edodes, Lactarius deterrimus, Lactarius Deliciosus, Terfezia bouderi chatin, Mantar.
Porsuk barajında bulunan Carassıus gibelio türü balıktan karbonik anhidraz enziminin saflaştırılması ve izolasyonu
Karbonik anhidraz (E.C.4.2.1.1 karbonat hidroliyaz, karbonat hidrataz) Zn+2 iyonu ihtiva eden bir metaloenzimdir. Memeli eritrositlerinde karbonik anhidraz, hücrelerde CO2'in hidrasyonu veya HCO3'ın dehidrasyonu reaksiyonlarını katalizler. Karbonik anhidraz böbrek, gastrik mukoza ve göz merceği, tükürük bezleri, beyin, sinir miyelin kılıfı, pankerans, prostat, uterus ve endometrium dokularında da aktivite gösterir. Ayrıca balıkların solungaç ve salgı organlarında, bazı böcek ve bakterilerde, kabuklu hayvanların kabuk yapımında ve yumurta kabuğunun oluşumunda, alglerde ve bitkilerin fotosentetik kloroplastlarında bu enzimin önemli rolleri olduğu bilinen bir gerçektir.Bu çalışmada kullanılan canlı Carassius gibelio sağlıklı ve olgundur. İsrail sazanının boyu 35 cm ve ortalama ağırlığı 3000 g dır. Tatlı suların dipleri çamurlu olan kısımlarında yaşamaktadır. Oksijen miktarı çok düşük olan sularda dahi yaşayabilmektedir. Ortalama su sıcaklığı 10?20 0C arasında olduğu tespit edilmiştir. İsrail sazanı istilacı bir tür olup aynı zamanda ekonomik değeri de bulunmamaktadır.Bu balıktan elde edilen homojenatın optimum pH, stabil pH, optimum sıcaklık ve iyonik şiddeti belirlenmiştir. Carassius gibelio `nun optium sıcaklığı 25 oC; optimum pH' ı 8,7; iyonik şiddeti ise 1 M olarak bulunmuştur. Daha sonra solungaçlarındaki karbonik anhidraz enzimi afinite jeli kullanılarak (Sepharose-4B-L-tirozin-sülfonilamid) saflaştırılmaya çalışılmıştır.Anahtar Kelimeler : Carassius gibelio, Sepharose-4B-L-tirozin-sülfanilamid, optimum pH, iyonik şiddet, stabil pH.
Siyah çay ekstresinin karbonik anhidraz enzimi üzerine etkisinin incelenmesi
Çay, Camellia sinensis olarak bilinen bir bitkinin yapraklarından elde edilir. Türk insanının günün her saatinde severek tükettiği geleneksel bir içecektir. Günümüzde, dünya çapında üretimi yapılan çayın siyah, yeşil ve oolong olmak üzere 3 çeşidi vardır.Karbonik anhidraz (E.C. 4. 2. 1. 1), merkezinde Zn+2 bulunan bir metaloenzimdir. Omurgalılarda CO2, bu enzimin substratıdır. Hücreler ve hücreler arası sıvıda CO2 ve H2CO3 dönüşümlerini katalizler.Bu çalışmada çayın karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri araştırılmıştır.Bu amaçla önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz izoenzimleri (CA-I, CA-II) afinite kromatografisi ile ayrı ayrı saflaştırıldı.Daha sonra farklı derişimlerdeki çayın insan eritrosit CA enzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanıldı. Çayın belli derişimlerde insan eritrosit CA hidrataz ve esteraz aktivitesinde inhibisyon etkisinin olduğu belirlendi. İnhibisyon etkisi gösteren çaylar için % aktivite- inhibitör konsantrasyonu [I] grafikleri çizildi.Bu çalışmada elde edilen verilere göre çayın farklı derişimlerinde düşük miktarlar alındığında inhibisyon etkisi, çay miktarı arttırıldığında ise aktivatör etkisi olduğu belirlendi.Anahtar Kelimeler: Karbonik anhidraz, inhibisyon, afinite kromatografisi
Yeni akridin türevlerinin antiglokom etkisinin ın vıtro olarak incelenmesi
Karbonik anhidraz (CA) (E.C. 4.2.1.1.), karbondioksitin HCO3 ? ve H+ iyonlarına iki basamakta dönüşümlü hidratasyonu reaksiyonunu katalizleyen, aktif bölgesinde çinko iyonu bulunduran bir metaloenzimdir. İnsan göz dokusunda CA I, CA II ve CA IV izoenzimleri bulunur. Bunlardan CA I ve CA II izoenzimleri sitozolik iken, CA IV izoenzimi membrana bağlıdır. Karbonik anhidraz inhibitörleri, aköz humorun fazla salgılanmasıyla oluşan yüksek göz içi basıncını (IOP) düşürdükleri için glokom tedavisinde kullanılırlar.Bu çalışmada glokom hastalığı tedavisinde kullanılmaya aday yeni karbonik anhidraz inhibitörlerinin bu enzim üzerindeki inhibisyon etkileri in vitro olarak araştırılmıştır.Öncelikle insan eritrositlerinden hCA I ve hCA II izoenzimleri afinite jeli (Sepharose-4B-L-tirozin-sülfanilamid) kullanılarak saflaştırıldı. Kalitatif ve kantitatif protein tayini yapıldı ve SDS-PAGE elektroforezi ile enzimlerin saflığı kontrol edildi. Enzim aktiviteleri kinetik çalışmalarla belirlendi.Daha sonra sentezlenen yeni bileşiklerin (1-9) insan eritrosit hCA I ve hCA II izoenzimleri üzerindeki inhibisyon etkileri incelendi. Bileşiklerin inhibisyon etkisini belirlemek için karbonik anhidraz enziminin hidrataz ve esteraz aktiviteleri ölçüldü. İnhibisyon etkisi gösteren bileşikler için %Aktivite-[I] grafikleri çizilerek IC50 değerleri belirlendi. Lineweaver-Burk grafikleri çizilerek Ki sabitleri hesaplandı.Sentezlenen yeni bileşiklerin, hCA I ve hCA II izoenzimlerinin hidrataz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi göstermediği, fakat esteraz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi gösterdiği tespit edildi. Esteraz IC50 değerleri hCA I için 0,71-0,27 µM arasında, hCA II için ise 0,52-0,21 µM arasında bulundu. Ki değerleri ise hCA I için 0,47-0,19 µM arasında, hCA II için ise 0,34-0,032 µM arasında bulundu.Anahtar Kelimeler: Glokom, Karbonik Anhidraz, Sülfonamitler, Akridin Bileşikleri, IC50 Değerleri.
Nigella sativa (çörek otu)'nın karbonik anhidraz enzim aktivitesi üzerinde etkisinin araştırılması
Nigella sativa, çörek otu olarak bilinen bir bitkidir. Bu bitki, Akdeniz bölgesinde ve Hindistan, Pakistan ve Afganistan'da dahil olmak üzere Batı Asya ülkelerinde yetişen bir baharattır. Nigella sativa tohumları, günümüzde astım ve diğer akciğer rahatsızlıkları, sindirim bozuklukları (örneğin; hazımsızlık, ishal) ve hiperlipidemi tedavisinde kullanılmaktadır. Ayrıca antioksidan etkileri ve bağışıklık düzenleyici özellikleri vardır.Karbonik anhidraz (E.C. 4. 2. 1. 1), merkezinde Zn+2 bulunan bir metaloenzimdir. Omurgalılarda CO2, bu enzimin substratıdır. Hücreler ve hücreler arası sıvıda CO2 ve H2CO3 dönüşümlerini katalizleyen bir enzimdir.Bu çalışmada Nigella sativa'nın, karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri araştırılmıştır. Bu amaçla önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz izoenzimleri (HCA-I, HCA-II) afinite kromatografisi ile ayrı ayrı saflaştırıldı. Daha sonra Nigella sativa (çörek otu) homojenatıları hazırlandı. Değişik konsantrasyonlardaki homojenatlar ile Nigella sativa'nın insan eritrosit CA enzimleri üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. Çalışmalarda karbonik anhidraz aktivitesinin belirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanıldı. HCA-I'in esteraz aktivitesi üzerinde çalışılan tüm konsantrasyonlarda inhibisyon etkisi gösterdiği belirlenmiştir. İnhibisyon etkisi gösteren homojenatlar için % aktivite-[I] grafikleri çizilerek IC50 değerleri bulunmuştur. HCA-I esteraz aktivitesine göre inhibisyon gösteren tüm konsantrasyonların IC50 değerleri (enzimli reaksiyon süresini yarıya düşüren inhibitör konsantrasyonu); 0,2101.104 ? M-0,0492.104 ? M arasında bulunmuştur. %0,1, %0,2, %0,3'lük konsantrasyonlardaki Nigella sativa homojenatlarının HCA-I üzerindeki inhibisyon etkisi incelendiğinde Ki değerleri; 4,290.102 ? M-3,980.102 ? M arasındadır. Ayrıca çalışılan tüm konsantrasyonlarında, hidrataz aktivitesi üzerine yapılan çalışmalarda aktivite görülmemiştir.Anahtar Kelimeler: Karbonik Anhidraz, İnhibisyon, Afinite Kromatografisi, IC50 Değerleri.
C vitamininin karbonik anhidraz enzimi üzerindeki etkisinin araştırılması
C vitamini (Askorbik asit); insanlarda sentezlenmeyen, indirgeyici ajan olarak görev yapan, antioksidan özelliği gösteren ve suda çözünen bir vitamindir. Bununla birlikte insan gözünde bulunan aköz sıvıda belirli konsantrasyonlarda askorbik asit olduğu bilinmektedir.Karbonik anhidraz (CA), karbondioksitin bikarbonata dönüşümlü hidratasyon reaksiyonunu katalizleyen, Zn+2 iyonu içeren bir metaloenzimdir. CA I, CA II ve CA IV izoenzimleri insan göz dokusunda bulunmaktadır. Glokom, yüksek göz içi basıncı ile karakterize edilen ve sonunda körlüğe yol açan bir göz hastalığıdır. Humor aközün fazla salgılanmasıyla oluşan yüksek göz içi basıncını düşürmelerinden dolayı karbonik anhidraz inhibitörleri, glokom hastalığının tedavisinde kullanılmaktadırlar.Bu çalışmada; C vitamininin karbonik anhidraz izoenzimleri olan hCA I ve hCA II üzerindeki inhibisyon etkisi araştırılmıştır. Bu amaçla önce afinite kromatografisi ile insan eritrositlerinden hCA I ve hCA II izoenzimleri ayrı ayrı saflaştırıldı ve SDS-PAGE elektroforezi ile enzimlerin saflığı kontrol edildi. Daha sonra C vitamininin farklı derişimlerdeki çözeltilerinin hCA I ve hCA II izoenzimleri üzerindeki inhibisyon etkileri incelendi. C vitamininin inhibisyon etkisini belirlemek için karbonik anhidraz enziminin hidrataz ve esteraz aktiviteleri ölçüldü. Elde edilen sonuçlara göre, %Aktivite-[I] grafikleri çizildi ve IC50 değerleri belirlendi. Lineweaver-Burk grafikleri çizilerek Ki sabitleri hesaplandı.Son olarak, farklı derişimlerdeki C vitamini çözeltilerinin, hCA I ve hCA II izoenzimlerinin hidrataz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi göstermediği, ancak esteraz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi gösterdiği tespit edildi. Esteraz IC50 değerleri hCA I için 0,96?103-0,07?103 ?M arasında, hCA II için ise 0,23?103-0,06?103 ?M arasında bulundu. Ki değerleri hCA I için 0,97?102-0,43?102 ?M arasında, hCA II için ise 1,2?102-0,36?102 ?M arasında bulundu.Anahtar Kelimeler: C Vitamini, Karbonik Anhidraz, İnhibisyon, IC50 Değerleri.
Karbonik anhidraz inhibitörleri olarak dioksoakridinin azotlu türevlerinin incelenmesi
Bu çalışmada, yeni sentezlenen akridin sülfaguanidin türevi bileşiklerin karbonik anhidraz izoenzimleri olan hCA I ve hCA II üzerindeki inhibisyon etkisi araştırılmıştır. Bu doğrultuda ilk olarak, afinite kromatografisi ile insan eritrositlerinden hCA I ve hCA II izoenzimleri ayrı ayrı saflaştırıldı ve SDS-PAGE elektroforezi ile enzimlerin saflığı kontrol edildi. Daha sonra 1-5 bileşiklerinin hCA I ve hCA II izoenzimleri üzerindeki inhibisyon etkileri incelendi. Bu bileşiklerin inhibisyon etkisini belirlemek için karbonik anhidraz enziminin esteraz ve hidrataz aktiviteleri ölçüldü. Elde edilen sonuçlara göre, %Aktivite-[I] grafikleri çizildi ve IC50 değerleri belirlendi. Son olarak, 1-5 bileşiklerinin hCA I ve hCA II izoenzimlerinin hidrataz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi göstermediği ancak esteraz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi gösterdiği tespit edildi. Esteraz IC50 değerleri hCA I için 118,4-257,5 ?M arasında, hCA II için ise 86,7-177,2 ?M arasında bulundu. Anahtar Kelimeler: Akridin Bileşikleri, Glokom, IC50 Değerleri, Karbonik Anhidraz, Sülfonamitler.
2-amino-6-metoksi benzotiyazol ile dipikolinik asidin türevlerinin karbonik anhidraz enzimi üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi
2-AMİNO-6-METOKSİ BENZOTİYAZOL İLE DİPİKOLİNİK ASİDİN TÜREVLERİNİN KARBONİK ANHİDRAZ ENZİMİ ÜZERİNE İNHİBİSYON ETKİLERİNİN İNCELENMESİ Melike ASLAN Kimya Bölümü, Yüksek Lisans Tezi, 2014 Tez Danışmanı: Doç. Dr. Metin BÜLBÜL ÖZET Karbonik anhidraz (E.C. 4. 2. 1. 1), aktif bölgesinde çinko iyonu bulunduran bir metaloenzimdir. Karbondioksitin HCO3 ve H+ iyonlarına dönüşümlü hidratasyonu reaksiyonunu katalizler. Bu çalışmada glokom hastalığı tedavisinde kullanılmaya aday yeni karbonik anhidraz (CA) inhibitörlerinin, karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri araştırılmıştır. Bu amaçla önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz izoenzimleri (CA-I, CA-II) afinite kromatografisi ile ayrı ayrı saflaştırıldı. Elektroforez ve spesifik aktivite tayini ile safsızlıkları ispatlandı. Daha sonra sentezlenen yeni bileşiklerin (1-6) insan eritrosit CA-I ve CA-II izoenzimleri üzerindeki inhibisyon etkileri incelendi. Bileşiklerin inhibisyon etkisini belirlemek için karbonik anhidraz enziminin hidrataz ve esteraz aktiviteleri ölçüldü. İnhibisyon etkisi gösteren bileşikler için %Aktivite-[I] grafikleri çizilerek IC50 değerleri belirlendi. Sentezlenen yeni bileşiklerin, CA-I ve CA-II izoenzimlerinin hidrataz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi göstermediği, fakat esteraz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi gösterdiği tespit edildi. Esteraz IC50 değerleri CA-I için 0,800 – 0,193 mM arasında, CA-II için ise 0,754 – 0,174 mM arasında bulundu. Anahtar Kelimeler: IC50 Değerleri, İnhibisyon, Karbonik anhidraz, Benzotiyazol, Dipikolinik asit.