COX-2 Geninin CRISPR/Cas9 aracılı düzenlenmesi için polimerik nanopartikül temelli transfeksiyon ajanının kullanılabilirliğinin araştırılması

Genom düzenleme çalışmaları birçok hastalığın tedavisi için bilim dünyasında umut uyandıran yeni bir teknolojidir. CRISPR/Cas9 sistemi günümüzde genom düzenleme çalışmalarında kullanılan en yaygın yöntemlerden biridir. CRISPR/Cas9'un basit, hızlı ve ucuz bir yöntem olması terapötik uygulamalar için büyük umut vaat etmektedir. Ancak, bu tekonolojinin hastalarda başarılı bir şekilde uygulanması için bazı zorlukların üstesinden gelinmesi gerekmektedir. CRISPR/Cas9 genom düzenleme sisteminin insan vücudundaki hedef hücrelere güvenli ve verimli bir şekilde ulaştırılması bu sistemin en büyük zorluklardan birini oluşturmaktadır. Gerçekleştirilen bu tez kapsamında, PβAE temelli transfeksiyon ajanı kullanılarak HUVEC hücre hattında CRISPR/Cas9 sistemi aracılı COX-2 geninin susturması gerçekleştirilmiştir. HUVEC hücre hattında COX-2 geninin susturulmasının doğrulanması Western blot analizi ile gerçekleştirilmiştir. Ayrıca COX-2 geninin susturulmasının bu hücrelerde hücre migrasyonu üzerine etkileri incelenmiştir. Sonuç olarak HUVEC hücre hattı için sentezlenen ve kullanılan PβAE transfeksiyon ajanının transfeksiyon verimi %90-95 ve Western blot sonucuna göre CRISPR verimi % 57.12 olarak hesaplanmıştır. Bu tez kapsamında kullanılan PβAE temelli nanopartikülerin, CRISPR/Cas9 aracılı genom düzenlemede özellikle plazmid transfeksiyonu için HUVEC hücre hattında iyi bir transfeksiyon ajanı olarak kullanılabileceğini ortaya koyulmuştur.