Diyadin (Ağrı)sıcak su kaynaklarından bakteri izolasyonu ve bazı enzimleri üzerinde çalışmalar

Bu çalışmada, Diyadin (Ağrı) sıcak su kaynaklarından su ve toprak örnekleri alınarak bu örneklerden 4 bakteri izole edildi. Bu izolatların morfolojik, fizyolojik ve biyokimyasal analizleri yapıldı. İzole edilen bakterilerden 1 nolu bakterinin çubuk şeklinde, gram pozitif, spor oluşturan, hareketli, ılımlı termofil olduğu ve 3 nolu bakterinin ise çubuk şeklinde, gram pozitif, spor oluşturan, hareketsiz ve ılımlı termofil olduğu belirlendi. Bakterilerin üremesi için optimum pH 1 ve 3 nolu izolatlar için sırasıyla 8 ve 7, optimum üreme sıcaklığı ise sırasıyla 50 oC ve 55 oC olarak belirlendi. Elde edilen izolatların ekstraselüler ??amilaz ve proteaz enzimi üretme yetenekleri araştırılarak, enzim aktivasyonunun optimum koşulları belirlendi. 1 nolu izolatın optimum ??amilaz üretimini 40. saatte (21,96 U/mg) gerçekleştirdiği ve ?? amilaz aktivitesinin optimum pH ve sıcaklık değerlerinin sırasıyla 8 ve 60 oC olduğu, proteaz üretiminin optimum 24. saatte (771 U/mg) gerçekleştiği ve proteaz aktivitesinin optimum pH ve sıcaklık değerlerinin sırasıyla 9 ve 50 oC olduğu belirlendi. 3 nolu izolat için ise ??amilaz üretiminin optimum 24. saatte (32 U/mg) gerçekleştiği ve amilaz aktivitesinin optimum pH ve sıcaklık koşullarının 7 ve 70 oC olduğu, protez üretiminin optimum 36. saatte (421 U/mg) gerçekleştiği ve proteaz aktivitesinin optimum pH ve sıcaklığının sırasıyla 10 ve 50 oC olduğu tespit edildi. Bu izolatlardan elde edilen ??amilaz ve proteaz enzimleri amonyum sülfat çöktürmesi ve diyaliz işlemlerine tabi tutuldu ve bu enzimlerin aktivitesi üzerine ağır metallerin etkisi araştırıldı. 1 (KP1)'in ekstraselülar ?-amilaz aktivitesinin 1,5 mM Mn+2 ve 1,5 mM Cu+2 iyonlarının bulunduğu ortamda arttığı, %1'lik SDS bulunan ortamda aktivitenin azaldığı, 1,5 mM Hg+2 iyonu bulunan ortamda ise enzimin tamamen inhibe olduğu belirlendi. İzolat 3 (DV3)'ün ??amilaz aktivitesinin 1,5 mM Hg+2 iyonu bulunan ortamda tamamen inhibe olduğu tespit edildi. İzolat 1 (KP1) için proteaz aktivitesinin 1,5 mM Ca+2 ve 1,5 mM Cu+2 iyonlarının bulunduğu ortamda arttığı, 1,5 mM Hg+2 iyonu 1,5 mM EDTA, %1'lik SDS bulunan ortamda aktivitenin azaldığı ve 1,5 mM PMSF bulunan ortamda ise enzimin tamamen inhibe olduğu belirlendi. İzolat 3 (DV3) için 1,5 mM Ca+2 ve 1,5 mM Zn+2 iyonlarının bulunduğu ortamda proteaz aktivitesinin arttığı, 1,5 mM Hg+2, %1'lik SDS bulunan ortamda ise aktivitenin azaldığı, 1,5 mM EDTA, 1,5 mM PMSF bulunan ortamda ise enzimin tamamen inhibe olduğu tespit edildi. Anahtar Kelimeler: Sıcak su kaynakları, Bakteri izolasyonu, Termofil bakteri, Basil, ?-Amilaz, Proteaz, Ağır metal