Transgenik fare kisspeptin nöronlarında erken dönem sosyal izolasyon ilişkili fonksiyonel ve aksonal plastisitenin araştırılması

Bu çalışmada adolesan dönemde maruz kalınan sosyal izolasyon stresinin, hipotalamik Arkuat Çekirdeğinde (ARC) bulunan Kisspeptin nöronlarının fonksiyonlarının ve aksonal uzantılarının nasıl etkilendiği araştırıldı. Bu amaçla Kiss:Cre transgenik fare hattı kullanıldı. Post-natal 21. günde (P21) fareler 3 haftalık sosyal izolasyona alındı. Bu dönemde fareler opak kafeslerde tek başına yaşarken sosyal gruptaki fareler normal kafeslerde üçerli gruplar halinde yaşatıldı. İzolasyon sonrasında farelerin lokomotor aktiviteleri, beslenme davranışları ve anksiyeteleri gözlendi. Kisspeptin nöronlarını görüntüleyebilmek için farelerin hipotalamik ARC bölgelerine GFP-Adone Associated Virüs (AAV) enjeksiyonu yapıldı. Bu farelerin ARC Kisspeptin nöronlarından elektrofziyoloji kaydı alındı. Projeksiyon analizi yapabilmek için ARC Kisspeptin nöronlarının aksonal uzantıları konfakal mikroskopta görüntülendi. ARC bölgesinde Kisspeptin, NörokininB ve Dinorfin nöropeptid ifadesi immünfloresan tekniği kullanılarak incelendi. Davranış deneylerinden elde edilen sonuçlara bakıldığında gece fazında izole gruptaki dişilerin diğer gruplardan daha aktif olduğu (p<0.005) erkeklerde ise sosyal gruptaki farelerin izole gruptakilerden daha aktif olduğu görüldü. Beslenme davranışlarında gruplar arasında anlamlı bir fark görülmedi. Yükseltilmiş artı labirent testinde izole gruptaki farelerin daha ankisyetik olduğu görüldü (p<0.05). Sosyal gruptaki farelerin ARC Kisspeptin nöronlarının aksiyon potensiyel frekanslarının izole gruptaki farelere göre daha yüksek olduğu (p<0.001), sosyal gruptaki dişi farelerin aksiyon potansiyel frekanslarının izole gruptaki dişi ve erkek farelere göre daha yüksek olduğu (p<0.001) görüldü. İmmünfloresan sonuçlarına bakıldığında izole gruptaki farelerin ARC bölgelerinde Dinorfin miktarının sosyal gruptan daha fazla olduğu (p<0.05) görüldü. Nerokinin B miktarının izole gruptaki farelerde, Kisspeptin miktarının ise sosyal gruptaki farelerde daha fazla olduğu gözlendi ancak istatistiksel anlamlılık görülmedi. Aksonal projeksiyon analizlerine bakıldığında sosyal gruptaki farelerin hipotalamik ARC Kisspeptin nöronlarının Anteroventral Periventricular (AVPV) bölgeye izole gruptakilere göre daha yoğun projeksiyon yaptığı gözlemlendi. Beynin diğer bölgelerine yapılan ARC Kisspeptin aksonal projeksiyonları için gruplar arasında bir fark görülmedi. Elde edilen bu bulgulara göre ergenlik döneminde maruz kalınan sosyal izolasyonun farelerin lokomotor ve anksiyte davranışlarını etkilediği ve Kisspeptin nöronlarının fonksiyonlarını baskıladığı görüldü.