Theileria annulata'nın hücre kültürü pasajlarında atenüasyon düzeylerinin moleküler belirteçler ile incelenmesi

Amaç: Bu araştırma T. annulata ile enfekte hücre kültürünün düşük, orta ve yüksek pasajlı suşlarında T. annulata'ya özgü atenüasyon markerları kullanılarak hedef gen bölgelerindeki ekspresyon seviyelerindeki farklılaşmaları tespit etmek amacı ile yapılmıştır. Gereç ve Yöntem: Bu çalışmada parazit materyali olarak, T. annulata 'nın Acarlar ve Cincin izolatlarına ait düşük, orta ve yüksek pasajlar, Ankara/Pendik izolatının orta ve yüksek pasajları ile aşı suşu olan TeylovacTM kullanılmıştır. İlk olarak, ilgili her bir izolattan RNA ektrakte edilmiş ve akabinde ekstrakte edilen her bir RNA örneğinden cDNA'lar sentezlenmiştir. Daha sonra atenüasyon markerları kullanılarak RT-PZR yapılarak farklı aşamadaki pasajlarda ilgili makerlerin ekspresyon seviyeleri incelenmiştir. Bulgular: Yapılan incelemeler sonucunda HDAC, ADAM-19, MMP9 ve TIMP-3 gen bölgelerinin ekspresyon seviyeleri ölçülmüş ve farklı pasajlara sahip izolatlar arasında gen ekspresyon seviyelerinde önemli bir artış veya azalma tespit edilmemiştir. Sonuç: Bu araştırmada atenüasyon markerı olarak belirlenen gen bölgelerinin kullanılan tüm izolatlarda eksprese edilmediği tespit edilmiştir. Ayrıca T. annulata hücre hatlarının farklı pasajları arasında ilgili genlerin ekspresyon seviyeleri arasında pozitif ve/veya negatif korelasyon belirlenemiştir. Anahtar Kelimeler: Atenüasyon, aşı, hücre kültürü, marker Theileria annulata