Fare karaciğer fibroz modelinde TRPC iyon kanal aile ifadelerinin ve TRPC6 inhibisyonunun tedavi etkinliğinin araştırılması

Karaciğer fibrozu, inflamasyona ya da direkt toksik hasara cevap olarak karaciğerde kollejen gibi ekstrasellüler matriks (ESM) bileşenlerinin aşırı birikmesi sonucu fibrotik doku oluşumu ile karakterize patolojik bir durumdur. Bu çalışmanın amacı, farelerde oluşturulan karaciğer Karbon Tetra Klorür (CCl4) fibroz modelinde TRPC3/6 iyon kanallarının blokajının muhtemel tedavi edici etkilerinin ve bu tedavi edici etkide aracılık eden inflamatuar yolakların biyokimyasal, histolojik ve moleküler düzeyde araştırılmasıdır. 50 adet BALB/c erkek fare her grupta 10 hayvan olacak şekilde Kontrol, Sham (Pyr3+SAR7334; P+S), Karbon Tetraklorür fibroz (CCl4), CCl4+Pyr3+SAR7334 (CCl4 +P+S) ve CCl4+Kolsişin (CCl4+Kol) gruplarına ayrıldı. Fibrozu oluşturmak için bir hepatotoksin olan CCl4 (30mg/kg) haftada 3 kez oral gavaj (og) yoluyla toplam 6 hafta süreyle verildi. Deneyin 3-6 haftaları arasında pozitif kontrol grubuna kolsişin (10mg/kg), sham ve tedavi gruplarına TRPC3 inhibitörü Pyr3 (10mg/kg/gün, intraperitoneal ) ve TRPC6 inhibitörü SAR7334 (2,5mg/kg/gün, og) eş zamanlı uygulandı. Dekapitasyon sonrası karaciğer dokularında inflamasyon ve fibroz ilişkili gen ifadeleri qRT-PCR, patolojik bozulmalar histolojik ve serum örneklerinde biyokimyasal yöntemlerle analiz edildi. Histolojik açıdan CCl4' ün ciddi fibröze neden olduğu tedavi gruplarında bu fibroz görüntüsünün azaldığı gözlendi. Biyokimyasal olarak CCl4'e maruziyeti sonucu artan, AST, ALT, albümin ve buluribin seviyelerinin tedavi gruplarında normalize olduğu belirlendi. qRT-PCR ile analiz verilerimiz CCl4' e maruz kalan farelerde TRPC3, TRPC6, PPAR-β/NFATC1/NFATC3 ifadelerinin anlamlı olarak arttığını, PPAR-α ve PPAR-ɣ seviyelerinin azaldığını hem kolsişin hem de TRPC3/6 inhibisyonunun bu yolakları normalize ettiğini gösterdi. IL4 ve IFN-ɣ'nın CCl4 maruziyeti ile artması sitokin seviyerindeki değişimlerin büyük ölçüde normalize olduğu belirlendi. Çalışmada TRPC3/6 inhibisyonunun CCl4 kaynaklı karaciğer hasarında hepatik toksisiteyi hafifletmede önemli bir terapötik etkiye sahip olduğu hepatik disfonksiyonu iyileştirebileceği ve histopatolojik değişiklikleri engelleyebileceği gösterilmiştir. Ek olarak, mekanizması oksidatif stresi ve inflamasyonu azaltma şeklindedir.